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單分子技術(shù)數(shù)字ELISA極速檢測(cè)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-07-19

   芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測(cè)單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測(cè)單個(gè)酶的能力來檢測(cè)用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測(cè)定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測(cè)定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很?。ㄍǔP∮?:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個(gè)分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記,則珠子,然后,。無法檢測(cè)到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積(通常為),并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號(hào)背景。芯棄疾JX-8B簡(jiǎn)易版單分子ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,超敏檢測(cè),常規(guī)試劑可輕松達(dá)到0.2pg!單分子技術(shù)數(shù)字ELISA極速檢測(cè)

單分子技術(shù)數(shù)字ELISA極速檢測(cè),數(shù)字ELISA

創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA;使用新型的fg級(jí)超敏免疫檢測(cè)simoa單分子產(chǎn)品原理;

它是一種DVD大小的圓盤,由24個(gè)陣列組成,每個(gè)陣列包含240微米大小的微孔,這些微孔呈徑向排列,以便使用藍(lán)光制造工藝和儀器內(nèi)的液體處理并行處理。圖2B顯示了集成陣列及其相關(guān)流體通道的設(shè)計(jì)。每個(gè)陣列由216,000個(gè)40飛升大小的微孔組成,以六邊形緊密排列模式排列在平面表面的3×4毫米區(qū)域內(nèi)。每個(gè)微孔的標(biāo)稱尺寸為4.25μm直徑、3.25μm深度和8μ米中心間距。流體通道深0.5毫米,通道和流體入口端口的總體積為74μLto,可容納珠子和密封油溶液。通道中包含一個(gè)收縮部分以減少液體回流。微珠的分級(jí)是西莫亞技術(shù)的關(guān)鍵要求,微孔的幾何形狀足以容納單個(gè)微珠(2.7μmdiameter;以下簡(jiǎn)稱珠子)。西莫亞圓盤由環(huán)烯烴共聚物(COP)制造,因其具有高通量注塑成型的適應(yīng)性,且成本低廉。具有良好的化學(xué)、生物和光學(xué)性能 高科技數(shù)字ELISA快速檢測(cè)芯棄疾單分子芯片依托單分散陣列化技術(shù),實(shí)現(xiàn)飛克級(jí)高靈敏檢測(cè),可捕獲數(shù)十萬反應(yīng)磁珠。

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芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關(guān)閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達(dá)到了數(shù)字動(dòng)態(tài)范圍的實(shí)際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號(hào)偏離了線性。因此,這里使用50,000個(gè)孔展示的數(shù)字線性動(dòng)態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個(gè)對(duì)數(shù)單位。前提是蛋白質(zhì)使用適當(dāng)?shù)拿笣舛冗M(jìn)行標(biāo)記,這種動(dòng)態(tài)范圍對(duì)于許多臨床應(yīng)用來說是足夠的

超多重檢測(cè)的臨床數(shù)據(jù)價(jià)值:標(biāo)記物組合的精細(xì)篩選,超多重檢測(cè)芯片通過21項(xiàng)指標(biāo)的同步檢測(cè),為疾病診斷提供了多維數(shù)據(jù)支持。在肺*普查中,同時(shí)分析29種標(biāo)記物的表達(dá)模式,可構(gòu)建特異性>80%的三聯(lián)檢測(cè)模型(如CEA+SA+CA242),較單一指標(biāo)檢測(cè)準(zhǔn)確率提升40%。在炎癥反應(yīng)評(píng)估中,IL-6、IL-8、TNF-α等多因子聯(lián)合分析,可精細(xì)判斷***類型與嚴(yán)重程度,指導(dǎo)個(gè)體化治療方案。該芯片的高通量特性還支持大規(guī)模隊(duì)列研究,通過機(jī)器學(xué)習(xí)算法挖掘標(biāo)記物組合的潛在關(guān)聯(lián),為精細(xì)醫(yī)療中的生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)提供了強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析基礎(chǔ),推動(dòng)檢測(cè)技術(shù)從單一指標(biāo)診斷向多維度精細(xì)分型升級(jí)。新型的單分子檢測(cè)方法的普及版;

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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

動(dòng)力學(xué)上,對(duì)于200,000個(gè)微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質(zhì)將在不到1min的時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散80μm。表明,在2小時(shí)的孵育過程中,蛋白質(zhì)分子的捕獲不會(huì)受到限制動(dòng)力學(xué)上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個(gè)珠子加載到50,000孔陣列中,通常會(huì)導(dǎo)致20,000–30,000個(gè)微球被困在1mL孔中。對(duì)于典型的背景信號(hào)為1%活性微球(見下文),這種裝載導(dǎo)致背景信號(hào)為200-300個(gè)活性微球檢測(cè)到,對(duì)應(yīng)于泊松噪聲的可接受變異系數(shù)(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導(dǎo)致:a)非特異性結(jié)合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導(dǎo)致活性微球的比例過低,從而導(dǎo)致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數(shù)字ELISA。同時(shí),為了獲得可接受的背景信號(hào)(1%)和泊松噪聲)。 芯棄疾單分子ELISA檢測(cè)試劑盒,多重超敏檢測(cè),多重指標(biāo)也能檢測(cè)到亞皮克級(jí)!醫(yī)療檢測(cè)數(shù)字ELISA快速檢測(cè)

數(shù)字 ELISA 芯片標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)流程嚴(yán)格,成品質(zhì)檢全檢,良品率穩(wěn)定在 98% 以上。單分子技術(shù)數(shù)字ELISA極速檢測(cè)

自動(dòng)化檢測(cè)與數(shù)據(jù)算法的深度融合:芯棄疾芯片搭載四參數(shù)Logistic曲線擬合(方程:y=(A-D)/[1+(x/C)^B]+D)與二次回歸算法(y=a+bx+cx2),確保熒光信號(hào)與濃度的高度線性關(guān)聯(lián)(r2≥0.999)。以IL-6檢測(cè)為例,自動(dòng)版設(shè)備通過AI驅(qū)動(dòng)圖像分析(CNN網(wǎng)絡(luò)),識(shí)別磁珠熒光強(qiáng)度(CV<3%),比較低檢測(cè)限達(dá)0.5pg/mL,較手動(dòng)操作靈敏度提升2倍。在質(zhì)量控制中,芯片內(nèi)置內(nèi)參校準(zhǔn)通道(如β-actin),自動(dòng)校正批次間差異,使檢測(cè)重復(fù)性(CV<5%)達(dá)到ISO15189標(biāo)準(zhǔn)。此外,數(shù)據(jù)平臺(tái)支持云端存儲(chǔ)與多中心結(jié)果比對(duì),為大規(guī)模流行病學(xué)研究(如10萬人隊(duì)列)提供標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)支持。單分子技術(shù)數(shù)字ELISA極速檢測(cè)