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湖北動物模型培養(yǎng)

來源: 發(fā)布時間:2025-08-19

糖尿病足大鼠模型【目的】構建糖尿病足大鼠模型;【材料】1、材料:STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉;2、試劑配制:1)檸檬酸納緩沖液配制:A液十B液=1:,PH=;A液:檸檬酸mL;B液:朽檬酸三納2)STZ液配制:55mg/kg(避光,現(xiàn)配現(xiàn)用10min內(nèi)注射);3、糖尿病模型構建方法:1)大鼠術前禁食12h;2)按55ug/g注射.連續(xù)3天注射,對照組注射檸檬酸緩沖液,造模組注射STZ液,注射后不禁水、禁食2-4h;3)STZ注射結束5天后空腹測血糖,血糖值高于12mmol/L選入實驗組;【方法】方法一:細菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時,后足背側注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液,造成糖尿病肢端的動物模型;2、后續(xù)觀察傷口情況;方法二:皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術剪做一個圓形皮膚創(chuàng)口,直徑5mm;2、后續(xù)每日觀察傷口情況,作好記錄。膽管結扎誘導炎癥性肝損傷和肝纖維化小鼠模型。湖北動物模型培養(yǎng)

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痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動物】SPF級SD大鼠,雄性,周齡6~8W,體重:200~250g【方法】1、大鼠麻醉,顱頂脫毛備皮;2、大鼠腦定位儀固定大鼠,顱頂正中切口,長度約2cm開口暴露前囟及矢狀縫;3、縫線將皮膚左右分開固定,前囟后10mm、矢狀縫左側;4、微量注射器移至開孔處修正骨孔,注射器垂直向顱內(nèi)插入,緩慢注射無水乙醇15ul,注射完移除注射器,棉球壓迫止血;5、縫合創(chuàng)口后維持25°體溫,等待蘇醒,觀察大鼠狀態(tài)。【觀察】術后3天模型大鼠攝食減少、右側肢體跛行、右前肢不負重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯,順時針繞圈前行,2周后癥狀減輕,大鼠于術后4周開始給予動物行為學觀察【檢測】HE檢測對比觀察腦組織是否出現(xiàn)細胞水腫,排列不規(guī)則,結構紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質軟化灶和空囊形成,小膠質細胞浸潤,星形膠質細胞肥大、增生等病理表現(xiàn)。曠場測試(OpenFieldTest):實驗用于評估大小鼠的活動性和探索性行為。動物被放置在一個較大的開放性場地內(nèi),然后記錄它們的運動軌跡和停留時間。用來評估動物的活動性、焦慮程度、壓力反應等。水迷宮測試。江蘇裸鼠動物模型手術故大腦中動脈阻塞(MCAO)模型被用于局灶性腦缺血的研究。

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應根據(jù)所檢測指標的要求,需采取不同策略處理。在如今分子生物學當?shù)赖默F(xiàn)實背景下,動物實驗除了對實驗動物的體征及生理指標進行的監(jiān)控外,各種分子檢測甚至是組學檢測也開始大行其道,動物實驗結束之后的機制研究成為了實驗的重頭戲。一般來說,動物實驗檢測對象主要包括:(1)體液中各類因子定性及定量檢測由于此類檢測對象多為蛋白及各類小分子物質,因此在取樣過程中應注意防止此類物質降解,在獲取后,應及時置于溫(≤-80℃)進行保存,在后續(xù)實驗過程中,也應當注意保存條件的穩(wěn)定性,避免反復凍融。常用的方法便是酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測方法的試劑盒(比色法、比濁法等)方法對各類生化指標及因子進行定性及定量檢測。(2)組織病理、生理變化及免疫組化檢測常用的病理檢測多使用H&E染色對細胞質及細胞核進行染色標記,以觀察細胞變化。除此之外,許多特殊染色也在病理生理變化中得到了應用,如利用Masson染色檢測組織纖維化病變,Nissl染色檢測神經(jīng)元損傷,β-半乳糖甘酶染色檢測細胞衰老等。此外,還可以通過免疫組化技術對某些特異性標記物進行免疫顯色檢測,達到原位定性或定量檢測的目的。。

指明方向。盡管現(xiàn)在基因組學、轉錄組、蛋白質組等組學已經(jīng)取得了非凡的突破,但人類對于組學的整體性和復雜性認識還是很初級,也就比開始高明那么一點點,對橫亙在組學和個體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一:由于目前還不存在什么生物根本性原理,很多研究還是得靠盲人摸象式的實驗、觀察和歸納。當年山中伸彌找到誘導分化細胞核重編程(也就是IPSc技術)的四個基因,可不是用理論算出來的,是大海撈針般地從成百上千個轉錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助,但本質還是差別不大,這也是為什么分子生物學科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個背景,你大概就能理解小鼠的意義。既然我們對復雜系統(tǒng)的架構原理毫無辦法,那我們不妨就建立一個標準模型,自上而下地研究問題。誠然,動物模型和人類差別巨大,小鼠、大鼠、兔、猴身上做的好好的實驗,放在人身上就不靈了(有時候,即使是針對某一個人群成功的實驗,換一個人群就不靈了,人類內(nèi)部的多樣性都不容小覷)。但是,同在哺乳動物大家庭,大家的系統(tǒng)架構應該是差不多的,差別只在細節(jié),問題已經(jīng)從大海撈針變成了池塘撈針。為什么藥物會失效呢?如果是靶點有差異。上面是我們已構建成功的動物模型,我們還可以根據(jù)客戶實驗方案構建其它模型,具體要求請咨詢。

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然后5%的nds。含有%triton)封閉通透2h,孵育一抗,4℃過夜。第二天,pbs清洗三次后,孵育相應的熒光二抗,然后再用pbs清洗三次,封片,觀察。結果見圖8,在小鼠4月齡時,通過視網(wǎng)膜冰凍組織切片染色外節(jié)抗體rhodopsin以及內(nèi)節(jié)抗體nak-atpase后發(fā)現(xiàn),相較于野生型小鼠,gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網(wǎng)膜外節(jié)明顯縮短,表現(xiàn)出了明顯退化表征。綜上,可以看出,本發(fā)明實施例以小鼠為例,通過cre-loxp基因敲除技術,在小鼠視網(wǎng)膜前體細胞中特異性敲除gm20541基因,小鼠表現(xiàn)出了視力受損,視細胞外節(jié)變短退化以及視細胞丟失等視網(wǎng)膜色素變性疾病典型表征。由此充分說明,在視網(wǎng)膜前體細胞敲除gm20541基因,可以使目標動物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性疾病。視網(wǎng)膜前體細胞敲除gm20541基因的動物,可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型。該疾病模型可以用于視網(wǎng)膜色素變性疾病研究等領域中,為該疾病的研究例如發(fā)病過程、機制以及相關藥物的篩選提供一種新的模型。雖然本發(fā)明實施例展示了在小鼠的視網(wǎng)膜前體細胞敲除gm20541基因后的表型,但本領域技術人員容易理解到,小鼠作為哺乳動物的代表性動物,在其他的哺乳類動物中敲除gm20541基因或其同源基因也應當具有相似的表型。特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是臨床上具有代表性的一種慢性纖維化性肺。上海C57動物模型技術

通過建立腦缺血-再灌注動物模型,模擬人類ICVD的病理過程。湖北動物模型培養(yǎng)

表明在gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外節(jié)變短退化。sixko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型小鼠;dapi(4,6-diamidino-2-phenylindole):細胞核染料4,6-二脒基-2-苯基吲哚;rhodopsin:視紫紅質抗體;merge:兩種顏色重疊。具體實施方式為使本發(fā)明實施例的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚,下面將對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者,按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。以下結合實施例對本發(fā)明的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例11采用rt-pcr方法檢測gm20541基因在不同組織的表達情況。方法:分別提取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾的總rna,然后用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。根據(jù)gm20541的cdna序列設計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3。以提取的cdna為模板,進行rt-pcr。擴增后進行電泳,結果見圖1。結果見圖1中a和b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541基因在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾中的表達。湖北動物模型培養(yǎng)