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細(xì)胞凍存概念：細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)...

研究表明被特定部位的細(xì)胞獲取的一些病癥外泌體可為一些病癥的轉(zhuǎn)移準(zhǔn)備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境。用肺轉(zhuǎn)傾向的一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的一些病癥細(xì)胞重新定向。外泌體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體具有不同的整合素（integri...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平mi...

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉(zhuǎn)子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Milli...

外泌體的提取、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法；尺寸排阻色譜法是利用分子篩理論，較初是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力，從而保證了外泌體的完整性。Mol等[13]對(duì)比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白，結(jié)果顯...

細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法，其中細(xì)胞凍存液，作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液，不光光是說(shuō)只是用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的保存，在細(xì)胞的購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過(guò)程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞...

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心，這種操...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平mi...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn)，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平mi...

細(xì)胞凍存秘籍：細(xì)胞凍存對(duì)于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞，通常每分鐘下降-1至-3℃。控制冷卻過(guò)程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng)。如果沒(méi)有程序降溫系統(tǒng)，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過(guò)夜。雖然這種方法適用于許多細(xì)胞系，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的...

外泌體：已經(jīng)有研究報(bào)道了各種Hh的胞外轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，但實(shí)際用于體內(nèi)Hh分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)的途徑尚不清楚。該研究顯示Hh在果蠅翅膀成蟲(chóng)盤(pán)的分泌依賴于運(yùn)輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合物（ESCRT）。在體內(nèi)，產(chǎn)生Hh的細(xì)胞中ESCRT活性的降低導(dǎo)致外部細(xì)胞表面保留Hh。此外，產(chǎn)生Hh的...

如果您正在或者準(zhǔn)備或者計(jì)劃開(kāi)展外泌體研究，歡迎加入我們的外泌體小課堂。首先，來(lái)個(gè)自我介紹：(實(shí)物照)品牌背景FUJIFILMWako前身為和光純藥株式會(huì)社，企業(yè)，也是全球前列的試劑供應(yīng)商，在歐美都設(shè)有分公司。自成立以來(lái)一直致力于的試劑生產(chǎn)與開(kāi)發(fā)，并獲得ISO9...

無(wú)血清細(xì)胞凍存液：1.逐滴加入5-7mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中，加入的同時(shí)輕輕混勻。2.室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘。3.吸出培養(yǎng)基，使細(xì)胞沉淀完好無(wú)損。使用2mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中。小心保持細(xì)胞作為聚集...

細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清，可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個(gè)方式，還可選擇20%的DMSO機(jī)上80%的小牛血清，配成兩倍的儲(chǔ)存液，在使用時(shí)細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用，特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用...

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。在過(guò)去的幾十年中，科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按...

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔...

近年來(lái)，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲(chóng)領(lǐng)域；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體來(lái)源及內(nèi)含物。幾乎所有類型的細(xì)胞都可以分泌外泌體，同時(shí)外泌體也普遍存在于體液中，包括血液、眼淚、尿液、唾液、...

細(xì)胞凍存中的注意事項(xiàng)：細(xì)胞凍存開(kāi)始時(shí)，要溫好相應(yīng)的培養(yǎng)基和相應(yīng)的試劑，以及計(jì)數(shù)耗材，避免操作過(guò)程中手忙腳亂。用移液管吹打相應(yīng)的胞液時(shí)，要保證移液管在液面以下吹打，管內(nèi)要有液體，防止產(chǎn)生相應(yīng)的氣泡，氣泡的張力會(huì)影響細(xì)胞的活率和生存狀態(tài)。計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)要保證取胞液時(shí)也...

研究中研究人員發(fā)現(xiàn)，胃病細(xì)胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征，并促進(jìn)胃病細(xì)胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導(dǎo)的遷移活動(dòng)。通過(guò)使用質(zhì)譜方法，研究人員確定載脂蛋白E（ApoE）是M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體中高度特異性...

年連續(xù)三年成為新賽美全產(chǎn)品線中“受客戶喜歡的科研產(chǎn)品”“無(wú)血清細(xì)胞凍存液關(guān)鍵技術(shù)及產(chǎn)業(yè)化”項(xiàng)目成功入圍“2017年?yáng)|吳科技創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)人才計(jì)劃“3優(yōu)勢(shì)分析傳統(tǒng)凍存液CELLSAVING成分“血清+培養(yǎng)基+dmso”四大類，成分明確，不含血清安全性1、微生物污染風(fēng)險(xiǎn)...

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA，能夠通過(guò)下調(diào)或壓制靶mRNAs來(lái)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá)，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中，參與一些病癥的形成和演化過(guò)程。單個(gè)miRNA可能通過(guò)壓...

細(xì)胞凍存秘籍：細(xì)胞凍存對(duì)于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞，通常每分鐘下降-1至-3℃。控制冷卻過(guò)程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng)。如果沒(méi)有程序降溫系統(tǒng)，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過(guò)夜。雖然這種方法適用于許多細(xì)胞系，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的...

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA等多種物質(zhì)，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體...

細(xì)胞凍存秘籍：細(xì)胞凍存對(duì)于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞，通常每分鐘下降-1至-3℃?？刂评鋮s過(guò)程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng)。如果沒(méi)有程序降溫系統(tǒng)，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過(guò)夜。雖然這種方法適用于許多細(xì)胞系，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的...

以前在另一家實(shí)驗(yàn)室的時(shí)候，凍存細(xì)胞根本就沒(méi)有講究這些標(biāo)準(zhǔn)操作。凍存的細(xì)胞有293T、PT67、C2C12、MEF(鼠胚胎成纖維細(xì)胞）、HelaS3、HelaD、U2OS、HKC、RK3E、ECO、H292、HSY、COS7、SupT1等。將細(xì)胞酶消化后直接參與...

對(duì)于很多科研汪來(lái)說(shuō)，細(xì)胞是脆弱又重要的寶貝之一，承擔(dān)著重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)希望。尤其是在凍存復(fù)蘇的時(shí)候，經(jīng)常會(huì)因?yàn)橐恍┬〖?xì)節(jié)導(dǎo)致問(wèn)題。比如：沒(méi)有控制好細(xì)胞的生長(zhǎng)密度細(xì)胞的密度對(duì)細(xì)胞的生存質(zhì)量有著重要的影響，畢竟它們是一群又不能擠著了也不能孤獨(dú)的嬌貴寶寶。密度過(guò)高會(huì)讓...

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí)，必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明，以便獲得較佳結(jié)果。在細(xì)胞處于生長(zhǎng)期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意較佳...

用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：1、抽血技巧。操作要輕柔迅速。試管可翻轉(zhuǎn)8-10次使樣本與抗凝劑混勻，避免劇烈搖晃?；靹蚝?，將試管固定垂直放置于離心分離器，在頂部記錄抽血的準(zhǔn)確時(shí)間，因?yàn)槌檠c離心之間的時(shí)間間隔可能是一個(gè)影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內(nèi)是比...

細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似，機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成，但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜，內(nèi)部任何的物理?yè)p傷對(duì)于它都是致命的。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰，所形成...

產(chǎn)品簡(jiǎn)介我們經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)研究與反復(fù)驗(yàn)證，研發(fā)出一系列新型細(xì)胞凍存產(chǎn)品，能有效地提高常規(guī)細(xì)胞、原代細(xì)胞與干細(xì)胞的復(fù)蘇后存活率與活力。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，使用方便，助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復(fù)雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法，專注于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。LiveCyteT...