使用方法：1)細(xì)胞超凈臺(tái)無菌環(huán)境，1.5mlEP管內(nèi)加入細(xì)胞混懸劑均勻混懸細(xì)胞，細(xì)胞終濃度為5×106個(gè)/ml，混懸液體積為200μl。細(xì)胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷，逐滴加入細(xì)胞凍存劑800μl，細(xì)胞混懸劑與細(xì)胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫，降溫速率為1℃/min，較后降溫至-80℃以下進(jìn)行凍存。將比較例1凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率與實(shí)施例5凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇率進(jìn)行對(duì)比，具體結(jié)果如附圖1所示，可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細(xì)胞的復(fù)蘇率。其他實(shí)施例通過與比較例1進(jìn)行比較，也得到相同的試驗(yàn)結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細(xì)胞復(fù)蘇率，同時(shí)還可減少不同批次細(xì)胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體，細(xì)菌，朊細(xì)菌及其他細(xì)菌顆粒引發(fā)的污染。無血清細(xì)胞凍存液使用方法：直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱，長期冷凍保存。杭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家

無血清快速細(xì)胞凍存液，是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液，可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白（Naturalantifrereprotein），不含動(dòng)物來源的血清成分，能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力，減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全，能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。無血清凍存液使用方法：1、收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞，離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細(xì)胞凍存液，重懸細(xì)胞，調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲(chǔ)存條件：2-8C保存，年有效：-20C保存，兩年有效。金華貴陽無血清細(xì)胞凍存液細(xì)胞保藏中心，用于細(xì)胞株的長期保存。

細(xì)胞凍存：取出凍存管，注明細(xì)胞名稱，代數(shù)，日期。離心后，以無菌吸管吸棄上清，不要吸到底部的細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞沉淀與凍存液充分混勻，根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果，將細(xì)胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細(xì)胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細(xì)胞凍存懸液分裝進(jìn)細(xì)胞凍存管中，一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴(yán)密封口后，使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1℃?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中，然后將凍存盒置于–80℃條件下過夜。若無凍存盒及其他凍存裝置，可以先將凍存管置于4℃30min，再-20℃凍存1h直至完全冷凍，再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過夜。第二天將已經(jīng)冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮容器中，置于液氮上方的氣相空間中儲(chǔ)存

產(chǎn)品簡介我們經(jīng)過長期的實(shí)驗(yàn)研究與反復(fù)驗(yàn)證，研發(fā)出一系列新型細(xì)胞凍存產(chǎn)品，能有效地提高常規(guī)細(xì)胞、原代細(xì)胞與干細(xì)胞的復(fù)蘇后存活率與活力。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，使用方便，助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復(fù)雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法，專注于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。LiveCyteTM（LC-1601）是即用型細(xì)胞凍存液，所含化學(xué)成分明確，無動(dòng)物源性成分，可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存并長期在-80℃冰箱保存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷，適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液，可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率。凍存要求發(fā)生改變，因?yàn)閮龃婕?xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用。

無血清細(xì)胞凍存：在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凍存是較關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞治好、細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對(duì)細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍，標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2/℃min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min。之前，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--20℃60分鐘--80℃過夜-液氮罐。不過，由于步驟較多，間隔時(shí)間又長，很容易遺忘。之后，人們也開始使用程序降溫盒。將凍存管放入程序降溫盒中，再將程序降溫盒放入-80℃冰箱。以1℃/min的速度進(jìn)行降溫。存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液。貴陽無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家

無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢：可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過程。杭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中，及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是必不可少的實(shí)驗(yàn)操作。因?yàn)樵跊]有建立一個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時(shí)候，細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時(shí)可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，如果沒有原始細(xì)胞的凍存，則因?yàn)樯鲜龅囊馔舛肮ΡM棄。杭州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家