細(xì)胞凍存步驟說(shuō)明：配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。去除PBS，加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái);離心1000rpm，5min;去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱，穩(wěn)定保存數(shù)年。杭州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷

無(wú)血清細(xì)胞凍存液：解凍解凍后，應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔。1.開(kāi)始之前，提前準(zhǔn)備好以下材料：試管，恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基，預(yù)先包被的培養(yǎng)板，確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意：不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2.在37°C水浴中快速解凍，持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管，直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài)。3.水浴中取出凍存管，用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15mL的錐形試管。注意：用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。蘇州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家批發(fā)價(jià)無(wú)血清凍存液使用方法：將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。

年連續(xù)三年成為新賽美全產(chǎn)品線中“受客戶喜歡的科研產(chǎn)品”“無(wú)血清細(xì)胞凍存液關(guān)鍵技術(shù)及產(chǎn)業(yè)化”項(xiàng)目成功入圍“2017年?yáng)|吳科技創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)人才計(jì)劃“3優(yōu)勢(shì)分析傳統(tǒng)凍存液CELLSAVING成分“血清+培養(yǎng)基+dmso”四大類，成分明確，不含血清安全性1、微生物污染風(fēng)險(xiǎn)2、批次不穩(wěn)定1、無(wú)微生物污染風(fēng)險(xiǎn)險(xiǎn)2、批次穩(wěn)定操作1、4℃(40min)→20℃(30min)→80℃→液氮2、程序性降溫盒（多人共用；異丙醇）直接凍于-80℃冰箱，長(zhǎng)期保存效果活率偏低，批次有差異，不適用無(wú)血清細(xì)胞凍存90%以上，復(fù)蘇后幾乎看不到死細(xì)胞

細(xì)胞凍存液的操作步驟：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞，除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來(lái);4.抽濾1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱，記數(shù)，調(diào)整凍存液中體細(xì)胞的較后相對(duì)密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.將體細(xì)胞分裝進(jìn)凍存管中，每管1～1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細(xì)胞的名字，凍存時(shí)間及作業(yè)者;8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃下列時(shí)，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時(shí)，則可快速滲入液態(tài)氮中。也可將配有體細(xì)胞的凍存管放進(jìn)-20℃電冰箱2h，隨后放進(jìn)-70℃電冰箱中留宿，取下凍存管，移進(jìn)液氮容器內(nèi)。無(wú)血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件：推薦將產(chǎn)品分裝成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液相對(duì)于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)有：1.即用型，無(wú)需現(xiàn)配，直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型，適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無(wú)需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡(jiǎn)單。4.不含血清，較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清，批次間差異小。6.無(wú)需液氮，-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過(guò)程。無(wú)血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分，含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。無(wú)血清細(xì)胞凍存液，為多種保護(hù)劑組合。溫州無(wú)血清細(xì)胞凍存液服務(wù)電話

無(wú)血清細(xì)胞凍存液，通用于人和各種動(dòng)物細(xì)胞株。杭州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷

無(wú)血清細(xì)胞凍存液，細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后，平均活細(xì)胞回收比例超過(guò)80%。與含血清凍存液比較，BI無(wú)血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表，BI無(wú)血清細(xì)胞凍存液也適用于動(dòng)物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。復(fù)蘇細(xì)胞：1.將細(xì)胞凍存管由液態(tài)氮中取出，置于37度水浴快速溶解回溫。此時(shí)可準(zhǔn)備培養(yǎng)基、無(wú)菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。2.于生物安全柜內(nèi)，直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融，使細(xì)胞團(tuán)塊化凍。3.先在無(wú)菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基，再將化凍的細(xì)胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細(xì)胞。4.倒去上清液，以新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。5.隔天更換新鮮培養(yǎng)基，并觀察細(xì)胞存活狀況。杭州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷