在現(xiàn)代分子生物學(xué)和基因工程領(lǐng)域,限制性核酸內(nèi)切酶是科學(xué)家們不可或缺的工具,而 EcoRV 無疑是其中一位“可靠伙伴”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。EcoRV 的識(shí)別序列是“GAT^ATC”,這一序列在基因組中相對(duì)常見,使得 EcoRV 能夠在多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行切割。與許多其他限制酶不同,EcoRV 會(huì)在識(shí)別序列的中心位置切斷 DNA 鏈,產(chǎn)生平末端(blunt ends)。這種平末端的特性使得 EcoRV 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。平末端可以與其他平末端的 DN片段直接連接,而不需要依賴于黏性末端的互補(bǔ)配對(duì),這為某些特定的克隆策略提供了靈活性。在基因工程中,EcoRV 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割和連接能力使得 EcoRV 成為基因工程中比較常用的工具酶之一。EcoRV 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 EcoRV 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。無論是基礎(chǔ)研究還是臨床診斷,它都能滿足多樣化的實(shí)驗(yàn)需求,助力科學(xué)研究的順利開展。Recombinant Mouse LRP10 Protein,His Tag
在現(xiàn)代分子生物學(xué)和基因工程領(lǐng)域,限制性核酸內(nèi)切酶是科學(xué)家們不可或缺的工具,而 FokI 無疑是其中一位“創(chuàng)新先鋒”。它不僅具有獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,還在基因編輯技術(shù)中發(fā)揮著重要作用。FokI 的識(shí)別序列是“GGATG”,這一序列在基因組中相對(duì)常見,使得 FokI 能夠在多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行切割。然而,F(xiàn)okI 比較獨(dú)特之處在于它的切割機(jī)制。與大多數(shù)限制性酶直接在識(shí)別位點(diǎn)附近切割 DNA 不同,F(xiàn)okI 的切割位點(diǎn)位于識(shí)別序列之外。這種特性使得 FokI 在基因編輯中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),能夠?qū)崿F(xiàn)更靈活的切割和插入操作。在基因工程中,F(xiàn)okI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。此外,F(xiàn)okI 還被用于開發(fā)新型基因編輯工具,如鋅指核酸酶(ZFN)和轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)因子樣效應(yīng)物核酸酶(TALEN)。這些工具利用 FokI 的切割活性,結(jié)合特異性 DNA 結(jié)合域,能夠在基因組的任何位置實(shí)現(xiàn)精細(xì)切割和編輯。FokI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 FokI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。Arg-Gly-Asp-Ser去泛素化酶可以去除泛素化標(biāo)記,這一步驟是泛素化過程的逆轉(zhuǎn)過程,它允許細(xì)胞對(duì)泛素化事件進(jìn)行精細(xì)調(diào)控。
Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種專為長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,廣應(yīng)用于基因組學(xué)、分子生物學(xué)以及復(fù)雜模板的擴(kuò)增研究中。該預(yù)混液結(jié)合了經(jīng)過配體修飾的熱穩(wěn)定Taq DNA聚合酶和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)25 kb的基因組片段。產(chǎn)品特點(diǎn)Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 的重要優(yōu)勢(shì)在于其長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力。該預(yù)混液融合了3'-5'校正活性因子,能夠提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性和特異性。此外,預(yù)混液中已包含dNTP和Mg2?,使用時(shí)只需加入模板和引物即可進(jìn)行反應(yīng),極大地簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程。該預(yù)混液還添加了保護(hù)劑,使其在反復(fù)凍融后仍能保持穩(wěn)定的活性,適合長(zhǎng)期保存。其擴(kuò)增產(chǎn)物的3'端帶有A堿基,可直接連接至T載體,便于后續(xù)克隆操作。應(yīng)用場(chǎng)景Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye) 適用于多種復(fù)雜的模板類型,包括基因組DNA、cDNA和質(zhì)粒DNA。它能夠高效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)25 kb的基因組片段、14 kb的cDNA片段以及40 kb的λDNA片段。這種長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力使其在基因組組裝、基因克隆和復(fù)雜基因組區(qū)域的擴(kuò)增中表現(xiàn)出色,尤其適合填補(bǔ)基因組缺口和端粒到端粒(T2T)基因組組裝。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)和基因工程領(lǐng)域,限制性核酸內(nèi)切酶是科學(xué)家們不可或缺的工具,而 MboI 便是其中一位“精細(xì)剪刀”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。MboI 的識(shí)別序列是“GATC”,這一序列在基因組中相對(duì)常見,使得 MboI 能夠在多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行切割。它會(huì)在識(shí)別序列的中心位置切斷 DNA 鏈,產(chǎn)生平末端(blunt ends)。這種平末端的特性使得 MboI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。平末端可以與其他平末端的 DN片段直接連接,而不需要依賴于黏性末端的互補(bǔ)配對(duì),這為某些特定的克隆策略提供了靈活性。在基因工程中,MboI 的應(yīng)用極為廣。科學(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割和連接能力使得 MboI 成為基因工程中比較常用的工具酶之一。MboI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 MboI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。這種染料能夠在PCR過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無堿基位點(diǎn)(AP位點(diǎn)),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對(duì)溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場(chǎng)景。此外,該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對(duì)RNA或不含尿嘧啶的DNA無作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會(huì)對(duì)檢測(cè)體系產(chǎn)生抑制。應(yīng)用場(chǎng)景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生抑制。AgeI 的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)領(lǐng)域的一大進(jìn)步。Recombinant Human IL-11
E1通常被認(rèn)為是泛素化過程中的限速步驟,因?yàn)樗婕暗椒核氐募て鸷虯TP的水解。Recombinant Mouse LRP10 Protein,His Tag
dUTP(脫氧尿苷三磷酸)是一種特殊的核苷酸,其結(jié)構(gòu)與dTTP(脫氧胸苷三磷酸)相似,但在堿基部分含有尿嘧啶而非胸腺嘧啶。dUTP在分子生物學(xué)中具有獨(dú)特的應(yīng)用價(jià)值,尤其是在DNA合成、PCR反應(yīng)以及基于尿嘧啶的標(biāo)記和檢測(cè)中。產(chǎn)品特點(diǎn)dUTP Solution (100 mM) 是一種高純度的即用型溶液,濃度為100 mM,能夠滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。與傳統(tǒng)的dNTP(如dATP、dTTP、dCTP和dGTP)不同,dUTP中的尿嘧啶可以被特定酶識(shí)別和作用,例如尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)。這一特性使其在某些實(shí)驗(yàn)中具有不可替代的作用。dUTP溶液經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保其純度和穩(wěn)定性。其高濃度設(shè)計(jì)便于實(shí)驗(yàn)人員根據(jù)具體需求進(jìn)行稀釋和使用,同時(shí)減少了試劑添加量,降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用場(chǎng)景dUTP在分子生物學(xué)中具有多種獨(dú)特的應(yīng)用:PCR反應(yīng)中的熱啟動(dòng):dUTP常用于熱啟動(dòng)PCR技術(shù)中,通過引入尿嘧啶標(biāo)記的引物,利用UDG酶在PCR反應(yīng)前降解引物,從而防止非特異性擴(kuò)增。DNA標(biāo)記與檢測(cè):dUTP可用于DNA標(biāo)記,通過將尿嘧啶引入DNA鏈,后續(xù)可通過UDG酶或熒光標(biāo)記的抗尿嘧啶抗體進(jìn)行檢測(cè),實(shí)現(xiàn)對(duì)特定DNA片段的標(biāo)記和追蹤。Recombinant Mouse LRP10 Protein,His Tag