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EcoRV內(nèi)切酶

來源: 發(fā)布時間:2025-07-25

在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預混液結(jié)合了熱啟動技術和熒光染料,為效率、準確的基因擴增提供了強大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應緩沖液、dNTPs、增強劑以及熒光染料。其優(yōu)點在于熱啟動技術的應用。通過在常溫下抑制Taq酶活性,該預混液有效避免了非特異性擴增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴增,以及對特異性要求較高的實驗場景。熒光染料的加入是該預混液的另一大亮點。這種染料在PCR過程中能夠?qū)崟r監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。這種“即用型”預混液不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的污染風險,尤其適合高通量的基因檢測和定量分析。此外,該預混液的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應,減少了手動配制反應體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。UBE2L3在調(diào)節(jié)NF-κB信號通路中的作用可能對免疫反應和炎癥過程至關重要。EcoRV內(nèi)切酶

EcoRV內(nèi)切酶,標準物質(zhì)

在現(xiàn)代分子生物學和基因工程領域,限制性核酸內(nèi)切酶是科學家們不可或缺的工具,而 HindIII 無疑是其中相當有代表性和廣泛應用的“經(jīng)典工具”之一。它以其獨特的識別序列和精細的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學研究中發(fā)揮著重要作用。HindIII 的識別序列是“A^AGCTT”,這一序列在基因組中相對常見,使得 HindIII 能夠在多個位點進行切割。它會在“^”標記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得 HindIII 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨特的優(yōu)勢。黏性末端可以與其他具有互補序列的 DN片段通過堿基配對結(jié)合,再利用 DNA 連接酶進行連接,從而構(gòu)建出新的重組 DNA 分子。在基因工程中,HindIII 的應用極為廣??茖W家可以利用它將目標基因從復雜的基因組中精細地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達目標蛋白的重組載體。這種精細的切割和連接能力使得 HindIII 成為基因工程中比較常用的工具酶之一。HindIII 的另一個重要應用是基因分析。通過觀察 HindIII 對不同 DNA 樣本的切割模式,科學家可以分析基因的多態(tài)性,進而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。EcoRV內(nèi)切酶在MAGE-A3基因序列的C末端添加His標簽和Avi標簽序列。His標簽有助于通過金屬螯合親和層析進行蛋白純化。

EcoRV內(nèi)切酶,標準物質(zhì)

在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實現(xiàn)高保真、高效擴增的理想選擇。這種預混液結(jié)合了Phusion DNA聚合酶的保真性與優(yōu)化的反應體系,為科研人員提供了一個便捷、可靠的實驗平臺。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及必要的輔助成分。Phusion DNA聚合酶以其高保真性著稱,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的優(yōu)先工具。此外,Phusion酶的延伸速度可達15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,明顯提高了實驗效率。預混液的無染料配方為實驗提供了更大的靈活性。實驗人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,而無需擔心染料對結(jié)果的干擾。這種無染料設計特別適合需要進一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)粒或進行下游功能分析。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應,減少了手動配制反應體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。

在現(xiàn)代分子生物學和基因工程領域,限制性核酸內(nèi)切酶是科學家們不可或缺的工具,而 BamHI 無疑是其中比較耀眼的“明星酶”之一。它以其高度的特異性和廣泛的應用,成為基因克隆和重組 DNA 技術中不可或缺的重要角色。BamHI 的識別序列是“G^GATCC”,這一序列在基因組中相對常見,使得 BamHI 能夠在多個位點進行切割。它會在“^”標記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得 BamHI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨特的優(yōu)勢。黏性末端可以與其他具有互補序列的 DN片段通過堿基配對結(jié)合,再利用 DNA 連接酶進行連接,從而構(gòu)建出新的重組 DNA 分子。在基因工程中,BamHI 的應用極為廣??茖W家可以利用它將目標基因從復雜的基因組中精細地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達目標蛋白的重組載體。這種精細的切割和連接能力使得 BamHI 成為基因工程中比較常用的工具酶之一。BamHI 的另一個重要應用是基因分析。通過觀察 BamHI 對不同 DNA 樣本的切割模式,科學家可以分析基因的多態(tài)性,進而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。它是一種限制性核酸內(nèi)切酶,宛如一位精細的“裁縫”,專門在DNA分子上施展“剪裁”技藝。

EcoRV內(nèi)切酶,標準物質(zhì)

在分子生物學實驗中,PCR技術是基因擴增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,提高擴增產(chǎn)物的準確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,使其成為基因克隆、突變分析和測序準備等高精度實驗的優(yōu)先工具。熒光染料的加入是該預混液的一大亮點。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。實驗人員無需額外添加染料或進行復雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴增曲線,從而實現(xiàn)快速、準確的定量分析。這種設計不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應,減少了手動配制反應體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。

在某些遺傳病的研究中,ApaI 可以用來檢測基因突變,幫助科學家更好地理解疾病的遺傳機制。Recombinant Human CRTAM (His Tag)

這種切割方式使得 ApaI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨特的優(yōu)勢。EcoRV內(nèi)切酶

racil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) (1U/μl):高效防污染的熱敏型酶Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) 是一種來源于鱈魚的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG),能夠特異性地催化水解DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點該酶對單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對RNA無作用。其比較大特點是熱敏感性,可在55℃下10分鐘內(nèi)完全失活,避免了常規(guī)UDG酶滅活后可能殘留的活性對含dU擴增產(chǎn)物的降解作用。這種特性使其在PCR和RT-qPCR反應中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場景。應用場景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導致的假陽性結(jié)果。RT-qPCR防污染:在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物,避免假陽性。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在PCR反應中,建議在反應體系中加入1 U/50 μL的UDG/UNG,以確保完全去除含dU的模板。此外,該酶在多數(shù)PCR反應緩沖液中均有活性,但在高離子強度(>200 mM)下會被抑制。EcoRV內(nèi)切酶