Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free):RNA電泳的可靠選擇Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)是一種為RNA電泳設(shè)計(jì)的緩沖液,廣應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。其主要成分包括450 mM Tris-硼酸、10 mM EDTA和DEPC處理水。這種配方經(jīng)過(guò)特殊處理,確保無(wú)RNase污染,能夠有效保護(hù)RNA樣品免受降解。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)無(wú)RNase污染:該緩沖液經(jīng)過(guò)DEPC處理,確保無(wú)RNase污染,適用于RNA電泳。高效分離:TBE緩沖液的緩沖能力較弱,適合分離小于2000 bp的DNA或RN片段。兼容性強(qiáng):適用于多種類(lèi)型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見(jiàn)的核酸染料(如EB或GoldView)。穩(wěn)定性高:5×TBE濃縮液比10×TBE更穩(wěn)定,不易產(chǎn)生沉淀,適合長(zhǎng)期儲(chǔ)存。使用方法稀釋緩沖液:使用時(shí)需用DEPC處理水或其他RNase-free的純水將5×TBE稀釋為0.5×TBE或1×TBE工作液。制備凝膠:用稀釋后的TBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。電泳操作:將RNA樣品加入凝膠孔中,使用稀釋后的TBE緩沖液進(jìn)行電泳。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用RNase-free的核酸染料對(duì)凝膠進(jìn)行染色,并在紫外透射儀下觀察結(jié)果。保存與注意事項(xiàng)保存條件:Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)應(yīng)保存在室溫或4℃條件下,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫或強(qiáng)光下。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)采用了經(jīng)過(guò)優(yōu)化的Taq DNA聚合酶與長(zhǎng)片段擴(kuò)增酶的混合體系顯著提高PCR反應(yīng)的延伸能力和準(zhǔn)確。吉林重組類(lèi)人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)臨床前研究
DNA Marker V:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的重要工具在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker V是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由多條已知長(zhǎng)度的線性雙鏈DNA片段組成,覆蓋從250 bp到5,500 bp的范圍。這些片段已溶解于1×Loading Buffer中,使用時(shí)可直接取5-10 μl進(jìn)行電泳,操作非常便捷。DNA Marker V的條帶清晰、亮度均勻,能夠?yàn)閷?shí)驗(yàn)人員提供準(zhǔn)確的分子量參考。其中,某些條帶(如1,000 bp或2,000 bp)通常被設(shè)計(jì)為加亮帶,以便于快速定位和半定量分析。此外,該產(chǎn)品在室溫下可穩(wěn)定保存3-6個(gè)月,長(zhǎng)期保存則建議置于4℃或-20℃。在實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker V能夠幫助研究人員快速估算目標(biāo)DNA片段的大小,并通過(guò)與樣品條帶的對(duì)比,初步判斷DNA片段的濃度。例如,在PCR產(chǎn)物分析或基因克隆實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker V為電泳結(jié)果的解讀提供了重要的參考依據(jù)。DNA Marker V的使用也非常靈活。它適用于不同濃度的瓊脂糖凝膠,用戶(hù)可以根據(jù)目標(biāo)片段的大小選擇合適的凝膠濃度。此外,該產(chǎn)品還建議在電泳時(shí)使用新鮮配制的瓊脂糖凝膠和緩沖液,以確保比較好的分離效果。
CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)技術(shù)服務(wù)是生物制藥和生物技術(shù)領(lǐng)域中的一項(xiàng)重要技術(shù),尤其在生產(chǎn)重組蛋白和抗體藥物方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。以下是一些關(guān)于CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)技術(shù)服務(wù)的關(guān)鍵點(diǎn):1.細(xì)胞特性:CHO(ChineseHamsterOvary,中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢)細(xì)胞由于其遺傳背景清晰、內(nèi)源蛋白分泌少,有利于外源蛋白的分離純化,并且可以在優(yōu)化條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)。2.服務(wù)內(nèi)容:提供從序列優(yōu)化、載體構(gòu)建、細(xì)胞株構(gòu)建,到細(xì)胞株優(yōu)化及質(zhì)控檢測(cè)的全套服務(wù),包括雙特異性抗體、單抗等CHO細(xì)胞株開(kāi)發(fā)服務(wù),以及蛋白酶、細(xì)胞因子等的表達(dá)服務(wù)。3.技術(shù)優(yōu)勢(shì):服務(wù)特色包括穩(wěn)定性良好、高產(chǎn)量、高質(zhì)量、快速的篩選高產(chǎn)細(xì)胞株周期(12-16周),以及符合cGMP規(guī)范的合規(guī)性。4.表達(dá)載體構(gòu)建:提供可選表達(dá)載體,如pAZ-V5系列載體(分泌型、可選His-tag),以及其他商業(yè)化載體,配合不同表達(dá)宿主如HEK293系列細(xì)胞和CHO系列細(xì)胞。5.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染小試:進(jìn)行細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和表達(dá)小試,通過(guò)WB(WesternBlot)進(jìn)行表達(dá)分析鑒定。6.表達(dá)及純化:提供擴(kuò)大培養(yǎng)、Ni柱親和純化以及重組蛋白鑒定檢測(cè)等服務(wù),確保蛋白樣品的質(zhì)量。
DL15000 Plus DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 Plus DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,覆蓋從250 bp到15,000 bp的范圍,能夠?yàn)榇笃蜠NA的分析提供精確的參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:DL15000 Plus 包含10條線狀雙鏈DNA片段,分別為250 bp、500 bp、1,000 bp、1,500 bp、2,500 bp、4,000 bp、5,000 bp、7,500 bp、10,000 bp和15,000 bp。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接上樣,無(wú)需額外處理。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長(zhǎng)期保存,室溫下也能穩(wěn)定保存6個(gè)月。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用0.6%-1.0%的瓊脂糖凝膠,電壓4-10 V/cm,電泳時(shí)間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,在紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時(shí)應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。電泳緩沖液:及時(shí)更換電泳緩沖液并使用新制備的凝膠,以免影響電泳結(jié)果。經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,100 mM dATP溶液在不同批次和不同實(shí)驗(yàn)條件下均表現(xiàn)出高度的重復(fù)性和可靠性。
在進(jìn)行HPVVLPs的糖基化修飾優(yōu)化時(shí),平衡成本和效率的策略可以從以下幾個(gè)方面考慮:1.選擇合適的表達(dá)系統(tǒng):不同的表達(dá)系統(tǒng)對(duì)成本和效率都有影響。例如,酵母表達(dá)系統(tǒng)具有生長(zhǎng)迅速、成本低廉、外源蛋白表達(dá)量高的優(yōu)點(diǎn),適合用于無(wú)囊膜VLPs疫苗的生產(chǎn),但是其蛋白質(zhì)糖基化修飾功能較弱。2.優(yōu)化培養(yǎng)條件和發(fā)酵工藝:通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)基的組成、溫度、pH值等條件,可以改善VLPs的表達(dá)和糖基化效率,同時(shí)控制生產(chǎn)成本。3.使用酶學(xué)和基因編輯技術(shù):利用酶學(xué)方法對(duì)特定糖基化位點(diǎn)進(jìn)行切割或修飾,或使用CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)對(duì)參與糖基化的關(guān)鍵基因進(jìn)行編輯,可以在不增加過(guò)多成本的前提下,改善糖基化模式。4.采用雜合共組裝技術(shù):通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)現(xiàn)不同型別HPV衣殼蛋白的雜合共組裝,可以形成具有新的糖基化模式和改善的穩(wěn)定性的VLPs,這可能提高疫苗的保護(hù)效率同時(shí)降低生產(chǎn)成本。5.優(yōu)化純化工藝:通過(guò)改進(jìn)純化工藝,提高VLPs的回收率和純度,減少生產(chǎn)過(guò)程中的浪費(fèi),可以有效地降低成本同時(shí)保證產(chǎn)品質(zhì)量。通過(guò)基因工程技術(shù),將目標(biāo)蛋白的基因克隆到表達(dá)載體中,并在選定的表達(dá)系統(tǒng)中進(jìn)行高效表達(dá)。河北酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)服務(wù)臨床前研究
DL1000 DNA Marker是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),已預(yù)混Loading Buffer,可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。吉林重組類(lèi)人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)臨床前研究
支持IND(InvestigationalNewDrug,新藥臨床試驗(yàn)申請(qǐng))的GMP蛋白生產(chǎn)技術(shù)服務(wù)在臨床前研究中扮演著至關(guān)重要的角色。GMP,即GoodManufacturingPractice(良好生產(chǎn)規(guī)范),是一套適用于制藥等行業(yè)的強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn),確保產(chǎn)品質(zhì)量符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),并能及時(shí)發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)過(guò)程中存在的問(wèn)題,加以改善。在臨床前研究階段,GMP蛋白生產(chǎn)服務(wù)通常包括以下幾個(gè)關(guān)鍵方面:1.多規(guī)模生產(chǎn)線:提供從50L到2000L不等規(guī)模的生產(chǎn)線,以適應(yīng)不同階段的臨床前研究需求。2.細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白純化:包括上游細(xì)胞培養(yǎng)、下游蛋白純化等GMP生產(chǎn)服務(wù),確保生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量和效率。3.一次性生產(chǎn)設(shè)備:使用一次性袋子的生物反應(yīng)器和液體存儲(chǔ)系統(tǒng),降低清潔和維護(hù)成本,減少交叉污染風(fēng)險(xiǎn)。4.質(zhì)量控制:進(jìn)行工藝測(cè)試與控制,包括表達(dá)量、蛋白質(zhì)濃度、滲透壓、細(xì)菌內(nèi)毒的素、無(wú)菌等測(cè)試,以及放行測(cè)試,確保DS(原料藥)和DP(藥物產(chǎn)品)的質(zhì)量。5.穩(wěn)定性研究:進(jìn)行長(zhǎng)期穩(wěn)定性、加速穩(wěn)定性、強(qiáng)降解穩(wěn)定性檢測(cè)和使用中穩(wěn)定性研究,以確保蛋白產(chǎn)品的穩(wěn)定性和可靠性。吉林重組類(lèi)人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)臨床前研究