基因探針，即核酸探針，是一段帶有檢測標記，且順序已知的，與目的基因互補的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交與目的基因結(jié)合，產(chǎn)生雜交信號，能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來。根據(jù)雜交原理，作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件：①應(yīng)是單鏈，若為雙鏈，必須先行變性處理。②應(yīng)帶有容易被檢測的標記。它可以包括整個基因，也可以**是基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之轉(zhuǎn)錄而來的RNA。DNA探針根據(jù)其來源有3種：一種來自基因組中有關(guān)的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄獲得了mRNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針，稱為cDNA探針（cDNA probe）。與基因組探針不同的是，cDNA探針不含有內(nèi)含子序列。此外，還可在體外人工合成堿基數(shù)不多的與基因序列互補的DNA片段，稱為寡核苷酸探針。探針卡是IC制造中對制造成本影響相當大的重要制程之一。虹口區(qū)特制探針品牌

特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣，也容易獲得，但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是，將特定的基因片段裝載到質(zhì)?；蚴删w中，經(jīng)過擴增、酶切、純化等復(fù)雜的步驟，才能得到一定長度的cDNA探針。這一過程比較復(fù)雜，有相應(yīng)條件的實驗室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下，由核酸合成儀來完成，可廉價獲得大量的此類探針。質(zhì)量也相對來說更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基，所以有良好的信號放大作用，但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十數(shù)個至數(shù)十個堿基，滲透性強，但信號放大作用則較差，合成的多相寡核苷酸探針，敏感性可以達到cDNA探針水平。徐匯區(qū)品牌探針生產(chǎn)廠家計算時應(yīng)用布拉格方程：nλ=2dsinθ。

電子探針是運用電子所形成的探測針（細電子束）作為X射線的激發(fā)源來進行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對象是固體物質(zhì)表面細小顆?；蛭⑿^(qū)域，**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12（Mg）至92（U），原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進行測量。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀，原因是電子探針X射線的本底值高于后者，但電子探針的***感量比其他儀器都高。此外，后期生產(chǎn)的儀器，可作X射線背散射照相、******照相。能兼作透射電鏡、能進行電子衍射、能作電子熒光觀察等。

DNA探針（DNA probe）是**常用的核酸探針，為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA，用特殊示蹤劑（如同位素、酶或有色基團）進行標記；在適當?shù)膒H值、溫度和離子強度下，DNA探針利用分子的變性、復(fù)性以及堿基互補配對的高度精確性，能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結(jié)合（雜交），形成雙鏈復(fù)合物（雜交體）。雜交體的穩(wěn)定性取決于兩條單鏈核苷酸之間的互補程度。在嚴格的條件下（高pH值、高溫、低離子強度），不完全匹配的雜交體的兩鏈將會解離，而完全匹配的雜交體將保持雙鏈。將未配對結(jié)合的探針洗去后，可用放射自顯影或酶聯(lián)反應(yīng)等檢測系統(tǒng)檢測雜交反應(yīng)結(jié)果。電子探針主要由電子光學系統(tǒng)（鏡筒），X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成。

用此探針在DNA文庫中篩選，陽性克隆即是目標蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細胞和原核細胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列，而原核則沒有。因此，真核基因組DNA探針用于檢測基因表達時雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針（包括cDNA探針）的主要優(yōu)點有下面三點：①這類探針多克隆在質(zhì)粒載體中，可以無限繁殖，取之不盡，制備方法簡便。②DNA探針不易降解（相對RNA而言），一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探針的標記方法較成熟，有多種方法可供選擇，如缺口平移，隨機引物法，PCR標記法等，能用于同位素和非同位素標記。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學顯微鏡。徐匯區(qū)品牌探針生產(chǎn)廠家

探針卡應(yīng)用在IC尚未封裝前，針對裸晶系以探針做功能測試，篩選出不良品、再進行之后的封裝工程。虹口區(qū)特制探針品牌

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對探針加以標記，以便在結(jié)合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優(yōu)點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。**常用的探針標記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標記的互補核苷酸補入缺口，DNA聚合酶Ⅰ的這兩種活性的交替作用，使缺口不斷向3’的方向移動，同時DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標記的核苷酸所取代。虹口區(qū)特制探針品牌

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