TAMRA(四甲基羅丹明)常作為熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)中的淬滅基團(tuán)與其他熒光基團(tuán)搭配使用,如與 FAM 等供體染料配合。當(dāng)供體染料被激發(fā)時,能量會轉(zhuǎn)移到 TAMRA 上并以非熒光形式耗散,從而實現(xiàn)對熒光信號的調(diào)控。在熒光定量 PCR 中,常利用這種能量轉(zhuǎn)移機制來檢測 PCR 產(chǎn)物的生成。例如,在 TaqMan 探針中,F(xiàn)AM 標(biāo)記在探針的 5' 端,TAMRA 標(biāo)記在 3' 端,當(dāng)探針完整時,F(xiàn)AM 的熒光被 TAMRA 淬滅;而在 PCR 延伸過程中,Taq 酶的 5' - 3' 外切酶活性會將探針?biāo)猓?FAM 與 TAMRA 分離,F(xiàn)AM 熒光恢復(fù),從而實現(xiàn)對 PCR 產(chǎn)物的定量檢測。特點:激發(fā)波長約為 550nm,發(fā)射波長約為 580nm,熒光顏色為紅色。TAMRA 具有較好的光穩(wěn)定性和較高的量子產(chǎn)率,能夠產(chǎn)生較強的熒光信號,并且與許多常用的熒光基團(tuán)具有良好的光譜兼容性,適用于多種熒光檢測平臺。通過檢測藥物處理后相關(guān)基因表達(dá)水平的變化,了解藥物的作用機制,為藥物的篩選和優(yōu)化提供依據(jù)。無錫CY3熒光定量PCR儀型號
實時熒光定量 PCR 儀在多個領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,以下是一些主要的應(yīng)用領(lǐng)域:疾病診斷:可對病毒、細(xì)菌等病原體的核酸進(jìn)行檢測,如、病毒、結(jié)核桿菌等,實現(xiàn)疾病的早期診斷。例如,在期間,實時熒光定量 PCR 儀是檢測核酸的重要工具,通過檢測患者樣本中病毒的核酸量,判斷是否以及的程度。疾病監(jiān)測:對于一些慢性疾病,如、心血管疾病等,實時熒光定量 PCR 儀可監(jiān)測相關(guān)基因的變化,輔助醫(yī)生了解疾病的發(fā)展進(jìn)程、效果以及預(yù)測疾病的復(fù)發(fā)風(fēng)險。例如,通過檢測患者體內(nèi)特定基因突變的頻率和拷貝數(shù),評估的惡性程度和后的殘留情況。藥物研發(fā):在藥物研發(fā)過程中,可用于研究藥物對基因表達(dá)的影響,篩選具有潛在作用的藥物靶點。同時,還可監(jiān)測藥物過程中患者體內(nèi)基因的變化,為個體化提供依據(jù)。例如,通過檢測患者在使用某種藥物前后腫瘤細(xì)胞中相關(guān)基因的表達(dá)水平,判斷藥物是否有效,并調(diào)整方案。泰州熒光定量PCR儀要多少錢對于一些隱性遺傳疾病,熒光定量 PCR 儀可用于檢測個體是否為致病基因的攜帶者。
應(yīng)用領(lǐng)域拓展:除了傳統(tǒng)的傳染病檢測、遺傳病診斷和**診斷與監(jiān)測等領(lǐng)域,熒光定量 PCR 儀在基層醫(yī)療設(shè)備升級中發(fā)揮著重要作用,縣域醫(yī)共體建設(shè)推動基層醫(yī)療機構(gòu)對其采購量增加。同時,在一些新興領(lǐng)域如**早篩、**變異毒株檢測等方面的應(yīng)用也在不斷深化,帶動了市場需求。國產(chǎn)替代加速:國產(chǎn)企業(yè)通過技術(shù)引進(jìn)與自主創(chuàng)新,在熒光定量 PCR 儀領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)突破,將同類進(jìn)口產(chǎn)品價格拉低 40%-60%,2024 年國產(chǎn)化率提升至 32%,國產(chǎn)儀器憑借高性價比、產(chǎn)品迭代更新快等特點,在市場中的份額逐漸增加。
熒光定量 PCR 儀應(yīng)用領(lǐng)域:醫(yī)學(xué)檢測病原體檢測:可快速準(zhǔn)確地檢測血液、體液或組織樣本中的病原體 DNA 或 RNA,如乙肝病毒、丙肝病毒、病毒、等,為性疾病的早期診斷和防控提供有力支持。遺傳病診斷:檢測與遺傳性疾病相關(guān)基因的突變,輔助臨床診斷和遺傳咨詢,如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等疾病的基因檢測。食品安全:致病菌檢測:檢測食品中的沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等致病菌,確保食品安全。轉(zhuǎn)基因成分檢測:對食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行定性和定量分析,保障消費者的知情權(quán)和選擇權(quán)。先進(jìn)的數(shù)據(jù)處理算法能去除噪聲、校正漂移,精確分析熒光信號變化,提高檢測靈敏度。
VIC與 FAM 類似,是一種熒光報告基團(tuán),可標(biāo)記在引物或探針上用于熒光定量 PCR。它在 PCR 過程中,隨著引物或探針與目標(biāo) DNA 的結(jié)合以及 PCR 產(chǎn)物的擴增,會發(fā)出特定波長的熒光,其熒光信號強度與 PCR 產(chǎn)物的量成正比,通過檢測熒光信號的變化來實現(xiàn)對目標(biāo) DNA 的定量分析。特點:激發(fā)波長和發(fā)射波長與 FAM 有所不同,激發(fā)波長約為 538nm,發(fā)射波長約為 554nm,熒光顏色為黃綠色。VIC 常用于多重?zé)晒舛?PCR 中,可與 FAM 等其他熒光染料同時使用,實現(xiàn)對多個不同目標(biāo)基因的同時檢測,因為其光譜特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號之間的相互干擾。通過檢測孕婦外周血中的胎兒游離 DNA 或羊水、絨毛等樣本中的胎兒基因,可對胎兒進(jìn)行遺傳性疾病的早期診斷。泰州96孔熒光定量PCR儀廠家供應(yīng)
在藥物研發(fā)過程中,可用于評估藥物對基因表達(dá)的影響。無錫CY3熒光定量PCR儀型號
熒光標(biāo)記探針法原理:使用一種特異性的熒光標(biāo)記探針,它能與目標(biāo) DNA 序列雜交。探針的 5' 端標(biāo)記有熒光報告基團(tuán),3' 端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán)。在游離狀態(tài)下,報告基團(tuán)發(fā)出的熒光會被淬滅基團(tuán)吸收,無法檢測到熒光信號。當(dāng) PCR 反應(yīng)進(jìn)行時,DNA 聚合酶在延伸引物的過程中,會將探針?biāo)?,使報告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,報告基團(tuán)發(fā)出的熒光信號就可以被儀器檢測到。每擴增一條 DNA 鏈,就會有一個探針被水解,釋放出一個熒光信號,熒光信號的強度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量成正比。過程:在 PCR 反應(yīng)的退火階段,熒光標(biāo)記探針會與目標(biāo) DNA 序列特異性結(jié)合。在延伸階段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性會將探針從 5' 端開始逐個水解,使報告基團(tuán)游離出來,產(chǎn)生熒光信號。儀器會在每個循環(huán)的延伸階段檢測熒光信號的強度,隨著 PCR 反應(yīng)的進(jìn)行,熒光信號逐漸增強,同樣可以得到 Ct 值。定量依據(jù):與熒光染料法類似,通過標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)待測樣本的 Ct 值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出起始模板量。由于熒光標(biāo)記探針具有特異性,能與特定的目標(biāo)序列雜交,因此可以更準(zhǔn)確地對目標(biāo)基因進(jìn)行定量分析,減少非特異性擴增的干擾。無錫CY3熒光定量PCR儀型號