熒光定量 PCR 儀是一種精密的儀器,正確的維護(hù)和保養(yǎng)可以延長其使用壽命,保證儀器的性能和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。長期維護(hù):定期多方面檢查:每年或每兩年對(duì)儀器進(jìn)行一次多方面的檢查和維護(hù),包括機(jī)械部件、電子元件、制冷系統(tǒng)等的檢查和保養(yǎng)。由專業(yè)的維修工程師對(duì)儀器進(jìn)行深度保養(yǎng),及時(shí)發(fā)現(xiàn)并更換潛在的故障部件,確保儀器的整體性能處于良好狀態(tài)。存放環(huán)境維護(hù):如果儀器長時(shí)間不使用,應(yīng)將其存放在干燥、清潔、溫度適宜的環(huán)境中,避免儀器受到潮濕、灰塵、震動(dòng)和電磁干擾等影響。定期通電開機(jī),讓儀器運(yùn)行一段時(shí)間,以保持各部件的正常性能。TET 熒光染料本身具有良好的熒光特性,其與核酸結(jié)合后能夠產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光信號(hào)。南通FAM熒光定量PCR儀功能
熒光定量 PCR 儀應(yīng)用領(lǐng)域:醫(yī)學(xué)檢測病原體檢測:可快速準(zhǔn)確地檢測血液、體液或組織樣本中的病原體 DNA 或 RNA,如乙肝病毒、丙肝病毒、病毒、等,為性疾病的早期診斷和防控提供有力支持。遺傳病診斷:檢測與遺傳性疾病相關(guān)基因的突變,輔助臨床診斷和遺傳咨詢,如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等疾病的基因檢測。食品安全:致病菌檢測:檢測食品中的沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等致病菌,確保食品安全。轉(zhuǎn)基因成分檢測:對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行定性和定量分析,保障消費(fèi)者的知情權(quán)和選擇權(quán)。南通FAM熒光定量PCR儀功能能夠準(zhǔn)確檢測食品中的轉(zhuǎn)基因成分,通過對(duì)轉(zhuǎn)基因作物中特定的基因序列進(jìn)行定量分析;
你可能想說的是 “實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀”。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀是一種用于對(duì)核酸進(jìn)行定量分析的儀器,在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。工作原理實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀基于 PCR 技術(shù),在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè) PCR 進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析。例如,常用的 SYBR Green I 染料,在游離狀態(tài)下熒光微弱,與雙鏈 DNA 結(jié)合后熒光明顯增強(qiáng),隨著 PCR 產(chǎn)物的合成,熒光信號(hào)不斷增加,儀器可實(shí)時(shí)檢測到這種變化。
熒光定量 PCR 儀的檢測結(jié)果會(huì)受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面,以下是具體介紹:樣本處理因素樣本采集:樣本采集的部位、時(shí)間和方法不當(dāng)都可能影響檢測結(jié)果。例如,采集的樣本量不足、未采集到病變部位的細(xì)胞,或者樣本被污染,都可能導(dǎo)致檢測到的目標(biāo)核酸含量不準(zhǔn)確,出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。核酸提取:核酸提取的質(zhì)量和效率直接關(guān)系到后續(xù)檢測。提取過程中若核酸被降解,會(huì)使模板量減少,導(dǎo)致定量結(jié)果偏低。此外,提取的核酸中若含有蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì),也會(huì)抑制 PCR 反應(yīng),影響擴(kuò)增效果和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。擁有高靈敏度的光學(xué)檢測系統(tǒng),能夠精確檢測 TET 等熒光染料發(fā)出的微弱熒光信號(hào),保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
ROX原理:主要用于熒光定量 PCR 中的校正和歸一化。在反應(yīng)體系中,ROX 的熒光強(qiáng)度相對(duì)穩(wěn)定,不受 PCR 反應(yīng)過程的影響。通過檢測 ROX 的熒光信號(hào),可以對(duì)其他熒光染料的信號(hào)進(jìn)行校正,消除由于加樣誤差、反應(yīng)體積差異、儀器波動(dòng)等因素引起的熒光信號(hào)變化,提高定量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。特點(diǎn):激發(fā)波長約為 570nm,發(fā)射波長約為 590nm,熒光顏色為紅色。ROX 通常與其他熒光染料如 FAM、VIC 等配合使用,在多重?zé)晒舛?PCR 中,為每個(gè)反應(yīng)孔提供一個(gè)穩(wěn)定的內(nèi)參熒光信號(hào),以便對(duì)不同孔之間的熒光信號(hào)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。使熒光信號(hào)能夠更準(zhǔn)確地反映目標(biāo)核酸的真實(shí)拷貝數(shù),提高檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性。江蘇Cy5熒光定量PCR儀詢問報(bào)價(jià)
對(duì)于一些隱性遺傳疾病,熒光定量 PCR 儀可用于檢測個(gè)體是否為致病基因的攜帶者。南通FAM熒光定量PCR儀功能
以下是判斷熒光定量 PCR 儀光路系統(tǒng)是否需要校準(zhǔn)的方法:熔解曲線異常峰形改變:熔解曲線的峰形變得不規(guī)則、寬化或出現(xiàn)多個(gè)峰,而樣品和實(shí)驗(yàn)條件均無變化時(shí),可能是光路系統(tǒng)對(duì)熒光信號(hào)的檢測精度下降,導(dǎo)致熔解曲線的分析結(jié)果不準(zhǔn)確,此時(shí)需要考慮對(duì)光路系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。Tm 值偏移:熔解曲線的 Tm 值(解鏈溫度)與預(yù)期值相比出現(xiàn)明顯偏移,且排除了引物設(shè)計(jì)、反應(yīng)條件等因素的影響,可能是光路系統(tǒng)的熒光檢測存在誤差,影響了對(duì) DNA 雙鏈解鏈過程的準(zhǔn)確監(jiān)測,需要對(duì)光路進(jìn)行檢查和校準(zhǔn)。南通FAM熒光定量PCR儀功能