FAM并不是一種特定的熒光定量PCR儀品牌或型號,而是一種在熒光定量PCR中常用的熒光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基熒光素,具有高量子產率,在被特定波長的光激發(fā)后會發(fā)出強烈的綠色熒光,其激發(fā)波長通常在495nm左右,發(fā)射波長在520nm左右。由于其熒光特性穩(wěn)定且靈敏,被廣泛應用于熒光定量PCR實驗中,作為報告分子來對目標DNA或RNA進行定量檢測。很多熒光定量PCR儀都可以使用FAM染料進行檢測,例如賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。這些儀器通常配備有能激發(fā)FAM染料發(fā)光的光源以及能檢測其發(fā)射熒光的光學系統(tǒng)。以QuantStudio?1Plus實時熒光定量PCR儀為例,它配備4種常用的激發(fā)和發(fā)射濾光片,包括FAM、VIC、ROX和Cy5,其激發(fā)光源為白光LED,激發(fā)范圍為455至530nm,可滿足FAM染料的激發(fā)需求。這有助于及時發(fā)現(xiàn)胎兒的遺傳缺陷,為家庭提供生育決策的依據(jù),減少出生缺陷的發(fā)生。無錫QPCR熒光定量PCR儀
以下是一些判斷熒光定量 PCR 儀光路系統(tǒng)是否需要校準的方法:熔解曲線異常峰形改變:熔解曲線的峰形變得不規(guī)則、寬化或出現(xiàn)多個峰,而樣品和實驗條件均無變化時,可能是光路系統(tǒng)對熒光信號的檢測精度下降,導致熔解曲線的分析結果不準確,此時需要考慮對光路系統(tǒng)進行校準。Tm 值偏移:熔解曲線的 Tm 值(解鏈溫度)與預期值相比出現(xiàn)明顯偏移,且排除了引物設計、反應條件等因素的影響,可能是光路系統(tǒng)的熒光檢測存在誤差,影響了對 DNA 雙鏈解鏈過程的準確監(jiān)測,需要對光路進行檢查和校準。江蘇CY3熒光定量PCR儀市場報價不同品牌和型號的 TET 熒光定量 PCR 儀在具體的檢測靈敏度上可能會有所差異;
ROX通常并不指代一種特定的熒光定量PCR儀,而是一種熒光染料,在熒光定量PCR中常被用作被動參考染料。其作用是用于校正熒光信號,減少孔與孔之間由于加樣誤差、反應體積差異、光學系統(tǒng)的微小變化以及蒸發(fā)等因素導致的熒光信號波動,提高實驗的準確性和重復性。在實時熒光定量PCR儀的使用中,很多儀器都可以兼容ROX染料進行信號校正。例如,賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABI的7500、7900等型號的熒光定量PCR儀都支持ROX染料。不同的熒光定量PCR儀在檢測通道、光學系統(tǒng)、熱循環(huán)性能等方面存在差異,但只要其具備相應的熒光檢測通道,能夠檢測ROX染料的熒光信號,并在軟件中支持以ROX信號作為參考進行數(shù)據(jù)校正,就可以在實驗中使用ROX染料來輔助提高定量分析的準確性。例如,QuantStudio1實時熒光定量PCR儀采用新型Optiflex光學檢測架構,提供FAM、VIC和ROX三種常用激發(fā)和發(fā)射濾光片,實現(xiàn)3重實時定量分析。
杭州柏恒(Bioer)Q9600Pro熒光定量PCR儀是一款備受科研人員青睞的高性能實驗設備。其出色的熒光信號強度、低背景噪聲和高靈敏度,使其在分子生物學領域中廣泛應用于基因表達分析、基因型鑒定、病毒載量測定等研究領域,為科研工作者提供了一個強有力的實驗工具。首先,Q9600Pro熒光定量PCR儀具有出色的熒光信號強度。通過精心設計的熒光探針和熒光檢測系統(tǒng),該儀器能夠準確捕獲PCR擴增過程中產生的熒光信號,并將其轉化為可靠的定量數(shù)據(jù)。強大的熒光信號帶來了更高的檢測靈敏度和準確性,使用戶能夠對微量目標物質進行快速、穩(wěn)定的定量分析。其次,Q9600Pro熒光定量PCR儀背景噪聲極低。低背景噪聲是保證實驗結果準確性的重要因素,可以有效降低假陽性信號的產生,提高實驗的可靠性。Q9600Pro熒光定量PCR儀在信號檢測和數(shù)據(jù)處理方面表現(xiàn)優(yōu)異,有效抑制了背景噪聲的干擾,確保了實驗結果的精細性和可重復性。另外,Q9600Pro熒光定量PCR儀具有高靈敏度。在微量樣本的體系中,靈敏度是評估PCR儀性能的重要指標之一。Q9600Pro熒光定量PCR儀通過優(yōu)化反應體系和熒光探針設計,能夠檢測到極低濃度的目標DNA或RNA,滿足科研人員對于高靈敏度實驗的需求。 通過檢測藥物處理后相關基因表達水平的變化,了解藥物的作用機制,為藥物的篩選和優(yōu)化提供依據(jù)。
熒光定量PCR儀的檢測結果會受到多種因素的影響,包括儀器設備、試劑質量、樣本處理以及實驗操作等方面,以下是具體介紹:儀器設備因素熱循環(huán)系統(tǒng):熱循環(huán)的準確性和均勻性至關重要。如果熱循環(huán)過程中溫度控制不準確,如實際溫度與設定溫度存在偏差,會導致PCR反應效率不穩(wěn)定,影響擴增產物的產量和質量,進而使檢測結果不準確。不均勻的溫度分布會使不同反應孔之間的擴增效果產生差異,增加實驗誤差。熒光檢測系統(tǒng):熒光檢測的靈敏度和準確性直接影響結果。儀器的光學部件性能不佳,如激發(fā)光源強度不足、熒光信號收集效率低,可能導致弱熒光信號無法被準確檢測到,影響對低拷貝數(shù)模板的定量分析。此外,熒光檢測通道之間的串擾也會干擾信號的準確測量,造成結果偏差。準確的熱循環(huán)系統(tǒng)對于保證 PCR 反應的特異性和效率至關重要,進而影響檢測靈敏度。徐州JOE熒光定量PCR儀廠家直銷
TET 的激發(fā)波長和發(fā)射波長使其能夠在特定的熒光通道中被準確檢測到,通常其激發(fā)波長在 520 - 550nm 左右;無錫QPCR熒光定量PCR儀
多重熒光定量 PCR:在同一反應體系中同時檢測多個目標基因時,VIC 熒光染料可與其他不同發(fā)射波長的熒光染料(如 FAM、ROX 等)組合使用。由于 VIC 的光譜特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號之間的相互干擾,從而實現(xiàn)對多個不同目標基因的同時定量分析。例如,在疾病診斷中,可同時檢測多個與疾病相關的基因標志物,提高診斷的準確性和全面性。SNP 基因分型:在單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測中,通過設計特定的引物和探針,利用 VIC 熒光染料標記不同等位基因的探針。在 PCR 反應過程中,根據(jù)不同等位基因與探針的特異性結合,產生不同的熒光信號,從而實現(xiàn)對 SNP 位點的分型。這種方法具有較高的準確性和靈敏度,可用于疾病關聯(lián)研究、藥物遺傳學研究以及個體遺傳特征分析等領域。無錫QPCR熒光定量PCR儀