環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數方法之芽孢洗脫及熱激活 在生物安全柜中,取4片(支)生物指示劑打開,取出載體,分別放置于含有3-4顆玻璃珠(直徑6mm)的無菌試管中,向無菌試管中加入3mL的含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水,置于渦旋混勻儀上充分振蕩,將試管中載體打散成纖維裝后,再中加入7mL含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水,震蕩30s,制成均一的菌懸液,將該試管記為10-1。 將水浴鍋加熱至80℃-85℃,取上述試管,放置于水浴鍋中熱激活10min,熱激完成后,立即將芽孢懸液轉移至0-4℃的冰水浴中冷卻至室溫。泰林生物指示劑的培養(yǎng)條件優(yōu)化,減少假陰性和假陽性結果。湖北泰林生物生物指示劑
氣體滅菌生物指示劑操作方法 01按法規(guī)要求或對應的指導原則,放置于規(guī)定位置,開啟消毒程序。 02待消毒周期結束后,將滅菌處理的含菌載體無菌轉移至生物安全柜中。 03將滅菌處理后的含菌載體接種至適量的無菌胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基(TSB)中,置于30~37℃培養(yǎng)7天。培養(yǎng)基裝量應能夠完全淹沒載體。 注:推薦在生物安全柜內接種,陽性對照最后接種,避免交叉污染 04觀察相應結果,TSB清澈為陰性,渾濁為陽性。陰性表示指示劑被完全殺滅,陽性表示指示劑未被完全殺滅。 05應同時做陽性對照,陽性對照是不將生物指示劑進行消毒,直接轉移載體至適量的培養(yǎng)基中,經過對應的條件培養(yǎng),陽性對照必須呈陽性,測試結果才有效。 泰林氣體滅菌生物指示劑完全按相關標準法規(guī)進行開發(fā),適用于臭氧、二氧化氯等氣體滅菌效果的監(jiān)控。 性能特點 1、采用不銹鋼片載體,菌體/芽孢分散,有效避免假陽性。 2、Tyvek?特衛(wèi)強透析材料,透氣率高,防護性強,阻菌效果優(yōu)于常用醫(yī)用包裝透析紙。自含式生物指示劑芽孢如何驗證滅菌過程的可靠性?泰林生物指示劑通過培養(yǎng)指示微生物明確判斷滅菌是否成功。
濕熱滅菌生物指示劑的選型 某滅菌程序的滅菌條件為121℃,12min,能否選擇FBio≥12min的生物指示劑? A:?能否選擇FBio≥12min的生物指示劑,需知曉該滅菌程序的FPhy值,即使是相同的滅菌參數,不同設備的FPhy的也可能存在較大差異,如脈動真空滅菌器和水浴滅菌器。建議根據《歐洲藥典》的要求,選擇物理殺滅時間FPhy將指示劑殺滅到10-1~10-3。 滅菌程序1參數為:121℃,8min,FPhy值為13min,選擇生物指示劑的D值為1.8min,芽孢數量為2.0×106cfu/支,可以將指示劑完全殺滅。滅菌程序2參數為:121℃,10min,FPhy值=15min,能否使用同一批生物指示劑? A:?本批生物指示劑的FBio經計算為11.3min,推薦應用于FPhy值在13.1~16.7min之間的滅菌程序。滅菌程序FPhy為13min經實驗證實可殺滅該批次生物指示劑;滅菌程序2的參數為121℃ 10min的殺滅程序符合將指示劑殺滅到10-1~10-3的要求,可以共同使用該批次生物指示劑。Q3
生物指示劑用于滅菌設備的性能確認,特定物品的滅菌工藝開發(fā)、建立,生產過程滅菌效果的監(jiān)控,也可用作隔離系統(tǒng)和潔凈室除菌效果的驗證評估等。 壓力蒸汽滅菌生物指示劑用于壓力蒸汽滅菌設備的性能確認、特定物品的壓力蒸汽滅菌工藝研發(fā)和建立、產品滅菌程序的驗證、生產過程滅菌效果的監(jiān)控、滅菌程序的定期再驗證等。 泰林壓力蒸汽滅菌生物指示劑 + 自含式專利設計防止培養(yǎng)基蒸發(fā)結構,培養(yǎng)基蒸發(fā)量≤10% + 變色培養(yǎng)基,48h獲得準確結果 + 醫(yī)用包裝透析紙能夠阻隔微生物并允許蒸汽穿透 + 精選載體便于微生物洗脫計數 中國藥典2020版9207《滅菌用生物指示劑指導原則》指出在滅菌程序的驗證中,生物指示劑的被殺滅程度,是評價一個滅菌程序有效性最直觀的指標,生物指示劑的芽孢率應在90%以上。 需符合ISO11138、GB18281、PDATR51及藥典(USP,EP,Chp)的質量要求,使用的芽孢可以追溯至專業(yè)合規(guī)的菌種保藏中心檢驗報告包含芽孢濃度,D值等相關數據。泰林生物指示劑可用于滅菌設備的性能確認和滅菌工藝的開發(fā)。
壓力蒸汽滅菌生物指示劑芽孢計數之熱激活處理、梯度稀釋(106濃度)和培養(yǎng)計數 將上述10-1試管放置于95℃~100℃恒溫水浴鍋中熱激活15min,熱激活結束后立即放入 0℃~4℃冰水混合浴中迅速冷卻至室溫。 注:根據生物指示劑總芽孢數適當調整稀釋級,建議最終稀釋芽孢數在30~300cfu/mL。 取最終稀釋的試管,用移液槍吸取1mL菌懸液加入90mm的一次性無菌平皿中,注入15mL ~20mL溫度不超過45 ℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA),混勻,每稀釋級至少制備2個平板。等待平板凝固后,倒置于恒溫培養(yǎng)箱中55℃~60℃培養(yǎng)24h~48h,記錄各平板的菌落數,并計算每片(支)生物指示劑的總芽孢數。泰林生物指示劑的芽孢可追溯至專業(yè)合規(guī)的菌種保藏中心,確保來源可靠。北京生物指示劑存活試驗
實驗室液體滅菌監(jiān)控:安瓿管式設計防破損,2-8℃冷鏈保存穩(wěn)定。湖北泰林生物生物指示劑
生物指示劑芽孢計數方法 2020版《中國藥典》指出,生物指示劑的被殺滅程度,是評價一個滅菌程序有效性最直觀的指標。 《藥品GMP指南》生物指示劑的應用中指出,實驗室在接受商品化生物指示劑時,應進行微生物數量測定。那么,生物指示劑的總芽孢數是如何確定的呢? 相關法規(guī)要求生物指示劑入廠總芽孢數復核要求樣品數不少于4個最小單位,應按照制造商提供的方法進行計數。因不同滅菌形式選用的指示微生物存在差異,對應的計數方法操作也存在很多不同,泰林生物生物指示劑經過嚴謹的方法學驗證,可以給用戶提供高效的入廠芽孢計數方法。湖北泰林生物生物指示劑