精液顯微鏡檢查精子計(jì)數(shù)：正常人精子計(jì)數(shù)為0．6×1012～1．5×0.012/L，相當(dāng)于一次排出的精子總數(shù)為400×106～600×106。當(dāng)精子計(jì)數(shù)值＜20×106/ml或一次排精總數(shù)＜100×106為精子減少，超過致孕極限而導(dǎo)致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷，是導(dǎo)致少精或無精的重要原因，也是導(dǎo)致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后，連續(xù)檢查無精子，說明手術(shù)成功，如果結(jié)扎兩個(gè)月后，精液中仍有精子，說明手術(shù)不成功。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，前向性（STR）?：平均路徑的直線性。南京精子分析精確溫度控制

男科實(shí)驗(yàn)室中通常所指的質(zhì)量包含三個(gè)方面：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量［3］。1．實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程［4］。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評(píng)定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機(jī)和計(jì)算機(jī)經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密；因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上、信息性的、統(tǒng)計(jì)學(xué)的或生物測量方面的檢查實(shí)驗(yàn)室難于進(jìn)行。南京CASA精子分析頻閃光源傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準(zhǔn)確率有待提高。

人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容，更具可操作性。本手冊對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存；對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序；所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng)，以監(jiān)測溫度和液氮液位，傳感器應(yīng)連接警報(bào)器，可通過實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無菌的液氮。

通過比較進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估1．室內(nèi)比較是采用同一個(gè)標(biāo)本在同一參數(shù)下?經(jīng)CASA多次測定后?應(yīng)用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)測得數(shù)值進(jìn)行比較。在男科實(shí)驗(yàn)室中對(duì)CASA系統(tǒng)的質(zhì)量控制通常使用影像磁帶或完全相同的凍存**標(biāo)本進(jìn)行日間比較。當(dāng)室內(nèi)比較作為結(jié)果質(zhì)量的一種評(píng)估時(shí)?計(jì)算機(jī)中數(shù)值的在線獲得是極具優(yōu)勢的。2．室間比較要求標(biāo)本向其他幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)送文獻(xiàn)中的一些報(bào)道闡述了該方面的經(jīng)驗(yàn)但是運(yùn)動(dòng)精子是不能在不受限制的條件下運(yùn)輸?shù)膶⑵渲糜谝旱羞\(yùn)送需進(jìn)一步考慮更多的因素（解凍技術(shù)、標(biāo)本的處理等）這些因素會(huì)影響活動(dòng)力參數(shù)；到目前為止室間比較的研究還未見滿意報(bào)道；Jorgensen等進(jìn)行了研究嘗試克服實(shí)驗(yàn)室間運(yùn)送解凍標(biāo)本的困難其研究方式是：邀請四個(gè)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員攜帶各自的儀器到同一個(gè)地點(diǎn)以各自通常采用的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行精子評(píng)估但未見明確的結(jié)論。3．對(duì)于精子活力測定CASA系統(tǒng)的測定與直觀評(píng)估的比較有文獻(xiàn)進(jìn)行了報(bào)道但結(jié)果并不相同。認(rèn)為直觀評(píng)估揭示標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值且其差異是由CASA系統(tǒng)的錯(cuò)誤引起的該觀點(diǎn)是不正確的；無論從理論上還是實(shí)踐中CASA數(shù)值比直觀評(píng)估所獲得的數(shù)值更接近于真值；對(duì)直線前進(jìn)的精子比例而言這一點(diǎn)是非常正確的。選擇合適的CASA檢測原理和設(shè)備，確保幀率要求，避免因設(shè)備問題影響檢測結(jié)果?。

CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：3.2**分析儀閾值的確定（1）精子灰度、對(duì)比度閾值：由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)?，?duì)亮度和對(duì)比度要求特別高，檢測時(shí)應(yīng)多次試用，尋找能準(zhǔn)確識(shí)別精子的比較好灰度閾值[8]。（2）碎片：測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾，測定活動(dòng)精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9]，這些也是需要注意的。對(duì)于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分，如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等，可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對(duì)于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi)，應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后，再涂片檢查，確認(rèn)無精后再出報(bào)告。Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能，能夠在短時(shí)間內(nèi)處理大量樣本，提高工作效率。美國狗精子分析W.H.O 4

不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大，因此，更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對(duì)促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。南京精子分析精確溫度控制

CASA，即計(jì)算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng)，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子，適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確?？煽拷Y(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個(gè)精子，結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí)，需精確測量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過活力評(píng)估。對(duì)于碎片過多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。南京精子分析精確溫度控制