RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現在已應用于各種正常細胞培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞,是培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎上,添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分。湖南DMEM細胞培養(yǎng)基源頭廠家
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,適合細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。 北京實驗細胞培養(yǎng)基檢測Ham’s F-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)液,添加血清后也廣泛應用于ai細胞和原代細胞的培養(yǎng)。
DMEM 培養(yǎng)基在細胞毒性測試中發(fā)揮著重要作用。在評估藥物、化合物或化妝品對細胞的毒性影響時,將細胞置于 DMEM 培養(yǎng)基中,再加入待測試物質??蒲腥藛T通過觀察細胞在含測試物質的 DMEM 培養(yǎng)基中的生長狀態(tài)、形態(tài)變化、增殖能力以及細胞死亡情況等指標,判斷測試物質的細胞毒性強弱。比如,在新藥研發(fā)初期,利用 DMEM 培養(yǎng)基進行細胞毒性測試,可初步篩選出細胞毒性較低的藥物候選物,減少后期研發(fā)風險,為新藥研發(fā)的安全性提供重要保障。
RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。
L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間,減少傳代次數,即節(jié)省了時間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天。門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養(yǎng)時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。 Ham’s F-12營養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)初用于CHO細胞的無血清培養(yǎng)。
含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡鹽溶液溶解)與合成培養(yǎng)基(如MEM細胞培養(yǎng)基)以1:1的比例混合使用。目前用于細胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外,血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。目前,血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5~20%,常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復雜,批間差異大及存在病毒等外源污染風險,對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響,在生物制藥行業(yè)的使用也越來越少。因此,基于對血漿成份的分析,合成細胞培養(yǎng)基應運而生。合成培養(yǎng)基是根據天然培養(yǎng)基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養(yǎng)基。開發(fā)的基礎培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM)。DMEM 培養(yǎng)基擁有多種配方,低葡萄糖濃度(1g/L)的配方,溫柔呵護對高糖敏感的細胞。上海華晨陽細胞培養(yǎng)基廠家
M199全稱Medium 199,即培養(yǎng)基199,是Morgan等在1950年設計的,初用于雞胚成纖維細胞的營養(yǎng)研究。湖南DMEM細胞培養(yǎng)基源頭廠家
DMEM 培養(yǎng)基成分復雜且精妙,除了富含氨基酸、維生素、葡萄糖、等主要成分外,還包含多種無機鹽。這些無機鹽在維持細胞內外滲透壓平衡方面發(fā)揮著關鍵作用,確保細胞不會因滲透壓異常而出現失水皺縮或吸水膨脹等情況,維持細胞正常形態(tài)。同時,無機鹽中的離子,如鈣離子、鎂離子等,參與細胞內的信號傳導過程,影響細胞的生長、分化和代謝等生理活動,為細胞的生命活動提供穩(wěn)定的離子環(huán)境,與其他營養(yǎng)成分協同作用,共同促進細胞的健康生長。湖南DMEM細胞培養(yǎng)基源頭廠家
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