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生物藥物生產(chǎn)過(guò)程中,DMEM 培養(yǎng)基扮演著關(guān)鍵角色。在單克隆抗體生產(chǎn)環(huán)節(jié),科研人員利用 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,使其大量增殖并分泌高純度的單克隆抗體。在疫苗生產(chǎn)方面,DMEM 培養(yǎng)基用于培養(yǎng)病毒抗原,如流感疫苗生產(chǎn)中,通過(guò)在 DMEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)流感病毒,獲取足夠的病毒抗原,進(jìn)而制備出安全有效的流感疫苗。此外,一些重組蛋白藥物的生產(chǎn)也依賴(lài) DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,這些細(xì)胞在培養(yǎng)基提供的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境下,高效表達(dá)出具有***價(jià)值的重組蛋白,為患者帶來(lái)希望。HeLa 細(xì)胞、Jurkat 細(xì)胞、 MCF-7 細(xì)胞、PC12 細(xì)胞、PBMC 細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用的培養(yǎng)基之一。湖南華晨陽(yáng)細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家
培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素,細(xì)胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-。但是,細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類(lèi)不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。貴州正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基廠家直銷(xiāo)MEM培養(yǎng)基(Minimum Essential Medium)也稱(chēng)比較低必需培養(yǎng)基、小基本培養(yǎng)基或低限量Eagle培養(yǎng)基。
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人開(kāi)發(fā)出來(lái)的,RPMI是該研究所開(kāi)發(fā)的一類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號(hào)。
RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。
RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。
RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨(dú)特的效果,是因?yàn)槠渲泻羞€原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對(duì)廣的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。
含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡鹽溶液溶解)與合成培養(yǎng)基(如MEM細(xì)胞培養(yǎng)基)以1:1的比例混合使用。目前用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。牛血清對(duì)絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。此外,血清含一些對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來(lái)自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體等都會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),甚至造成細(xì)胞死亡。目前,血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5~20%,常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復(fù)雜,批間差異大及存在病毒等外源污染風(fēng)險(xiǎn),對(duì)下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響,在生物制藥行業(yè)的使用也越來(lái)越少。因此,基于對(duì)血漿成份的分析,合成細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)運(yùn)而生。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)、配制的培養(yǎng)基。開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM)。DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營(yíng)養(yǎng)成分。
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用較廣的培養(yǎng)基之一。
HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響??捎糜跓o(wú)CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,常適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類(lèi)(特別是雌)的作用,因此在用到雌敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外,一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱(chēng)為“雙抗”。 Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。海南醫(yī)用細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
高糖 DMEM 適合生長(zhǎng)快、粘附低的細(xì)胞,如腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng) 。湖南華晨陽(yáng)細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家
Ham’sF-12營(yíng)養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營(yíng)養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)而成的,初用于CHO細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無(wú)血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,在低血清含量下時(shí),特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),添加血清后也廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng),如大鼠肝細(xì)胞、大鼠前列腺上皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、大鼠成肌細(xì)胞、雞胚胎細(xì)胞等。此外,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)更為豐富,使用更為較廣。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門(mén))冬酰胺、L-天(門(mén))冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長(zhǎng)快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴(lài)性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。 湖南華晨陽(yáng)細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家
深圳市華晨陽(yáng)科技有限公司是一家有著雄厚實(shí)力背景、信譽(yù)可靠、勵(lì)精圖治、展望未來(lái)、有夢(mèng)想有目標(biāo),有組織有體系的公司,堅(jiān)持于帶領(lǐng)員工在未來(lái)的道路上大放光明,攜手共畫(huà)藍(lán)圖,在廣東省等地區(qū)的醫(yī)藥健康行業(yè)中積累了大批忠誠(chéng)的客戶粉絲源,也收獲了良好的用戶口碑,為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),也希望未來(lái)公司能成為行業(yè)的翹楚,努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量,我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息,斗志昂揚(yáng)的的企業(yè)精神將引領(lǐng)深圳市華晨陽(yáng)科技供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌,共創(chuàng)佳績(jī),一直以來(lái),公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠(chéng)實(shí)守信的方針,員工精誠(chéng)努力,協(xié)同奮取,以品質(zhì)、服務(wù)來(lái)贏得市場(chǎng),我們一直在路上!