其也是可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發(fā)明的實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。sequencelisting四川省人民醫(yī)院利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。通過(guò)截?cái)啻笫竺娌可窠?jīng)致面癱模型的建立。云南實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型手術(shù)

曾為國(guó)內(nèi)、外醫(yī)藥企業(yè)做過(guò)多個(gè)藥物的臨床前藥理研究，研發(fā)產(chǎn)品已成功上市。在中國(guó)工作期間參加完成10項(xiàng)課題，在美國(guó)參與完成了NIH(NationalInstitutesofHealth)及AHA(AmericanHeartAssociation)的多個(gè)基金項(xiàng)目。發(fā)表學(xué)術(shù)論文60余篇，曾獲得省部級(jí)一、二等科技獎(jiǎng)7項(xiàng)。在學(xué)術(shù)期刊如Nature,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,JournalofClinicalInvestigation,Circulation,CirculationResearch,Cell,NatureCommunications,NatureMetabolism,ScienceTranslationalMedicine發(fā)表多篇論文。手術(shù)疾病模型精選案例1.心肌梗死模型（左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)）與缺血再灌注損傷模型2.主動(dòng)脈弓縮窄3.慢性心力衰竭模型賽業(yè)生物可提供的小動(dòng)物手術(shù)疾病模型及相關(guān)服務(wù)心腦血管系統(tǒng)手術(shù)心肌梗死模型（左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)）心臟缺血再灌注損傷模型主動(dòng)脈弓縮窄術(shù)(TAC)升主動(dòng)脈縮窄術(shù)腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)（模型）心力衰竭模型肺動(dòng)脈高壓模型大腦中動(dòng)脈栓塞。湖北動(dòng)物模型飼養(yǎng)博來(lái)霉素誘導(dǎo)急性肺損傷小鼠模型。

我們知道WB實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣，一次實(shí)驗(yàn)歷時(shí)也不短，從提蛋白到顯影結(jié)束可能要三天，我們就講一下這里面的一些關(guān)鍵環(huán)節(jié)。一、蛋白提取及變性1、提取蛋白很多經(jīng)驗(yàn)豐富的WB實(shí)驗(yàn)者都深有體會(huì)，蛋白提取是影響結(jié)果重要的環(huán)節(jié)之一。該過(guò)程重要的是防降解和保證蛋白濃度不要太低。防降解主要有兩點(diǎn)，一是裂解前注意保持樣品處于低溫環(huán)境中，二是裂解時(shí)加入足夠的蛋白酶抑制劑。我們習(xí)慣先用冰冷的PBS做心臟的體循環(huán)灌注，然后冰上取腦，分離各腦區(qū)(嗅球，皮層，海馬，中腦，小腦，延髓，丘腦，紋狀體)后置于，用液氮速凍后轉(zhuǎn)移至-80度冰箱長(zhǎng)期保存。接著是保證蛋白濃度，即要加入適量的裂解液，加太少會(huì)使蛋白提取不充分，加太多會(huì)讓蛋白濃度太低，一般經(jīng)驗(yàn)是這樣的，細(xì)胞樣品例如一個(gè)六孔板的細(xì)胞加60微升的裂解液，動(dòng)物組織的話每毫克組織加10微升裂解液。還要加上超聲破碎處理，具體方案見(jiàn)討論部分。如果沒(méi)有超聲破碎儀，那就用1毫升注射器不斷抽吸，冰上反復(fù)抽吸1分鐘左右，注意不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡。(需要灌注取材的視頻可以私聊獲取，由于文件過(guò)大，又比較血腥，不宜直接放到文章里。)2、蛋白變性加入上樣緩沖液后100攝氏度煮10分鐘，這里的上樣緩沖液有兩種可選。

橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱：橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：150g-180g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2016橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型20周詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法：橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，**注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個(gè)月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束測(cè)量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動(dòng)脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：門靜脈及腸系膜上動(dòng)脈血流量情況與正常對(duì)照組比較均增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義肝組織病理可見(jiàn)肝硬化病理改變。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明：1、如有特殊要求，請(qǐng)另詢價(jià)。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。急性肺損傷(acute lung injury，ALI)。

糖尿病足大鼠模型【目的】構(gòu)建糖尿病足大鼠模型；【材料】1、材料：STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉；2、試劑配制：1）檸檬酸納緩沖液配制：A液十B液=1:，PH=；A液:檸檬酸mL；B液:朽檬酸三納2）STZ液配制:55mg/kg（避光，現(xiàn)配現(xiàn)用10min內(nèi)注射)；3、糖尿病模型構(gòu)建方法：1）大鼠術(shù)前禁食12h；2）按55ug/g注射.連續(xù)3天注射，對(duì)照組注射檸檬酸緩沖液，造模組注射STZ液，注射后不禁水、禁食2-4h；3）STZ注射結(jié)束5天后空腹測(cè)血糖，血糖值高于12mmol/L選入實(shí)驗(yàn)組；【方法】方法一：細(xì)菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時(shí)，后足背側(cè)注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液，造成糖尿病肢端的動(dòng)物模型；2、后續(xù)觀察傷口情況；方法二：皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術(shù)剪做一個(gè)圓形皮膚創(chuàng)口，直徑5mm；2、后續(xù)每日觀察傷口情況，作好記錄。IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見(jiàn)的原發(fā)性腎小球疾病,約占原發(fā)性腎小球疾病的 1/3。湖南哪里有動(dòng)物模型建模

由于卵巢早衰的病因多種多樣,如自身免疫功能異常、遺傳因素、代謝因素、化療、放療及等。云南實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型手術(shù)

brain：腦組織；liver：肝臟；retina：視網(wǎng)膜，intestine：腸；muscle：肌肉；heart：心臟；kidney：腎臟；spleen：脾；b：圖1中a的統(tǒng)計(jì)結(jié)果；c:westernblot檢測(cè)gm20541蛋白在不同組織的表達(dá)；d:圖1中c的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。圖2：gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線；圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖3：中長(zhǎng)距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果；圖中：a：擴(kuò)增5’端長(zhǎng)臂使用引物對(duì)gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為；其中a2,3,6,9,10,b1為陽(yáng)性；b：擴(kuò)增3’端長(zhǎng)臂使用引物對(duì)neof和gm3’lrr，擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽(yáng)性雜合子，+/+為野生型對(duì)照。圖4：gm20541基因敲除小鼠的鑒定；a：gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果；b：實(shí)時(shí)定量pcr實(shí)驗(yàn)分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率，證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達(dá)；sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖5：暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測(cè)結(jié)果；圖中：a-c：不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖；d：不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計(jì)。云南實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型手術(shù)