原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。動物轉(zhuǎn)染試劑原理
基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,粘附到細胞膜表面,借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì)。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時間,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響,因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長,且重復性不佳。基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導入細胞膜內(nèi)。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經(jīng)過內(nèi)吞被導入細胞。此方法操作簡單,重復性好,在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,但具有一定的細胞毒性,可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑公司將20μL轉(zhuǎn)染復合物加入孔中的細胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,混合均勻;
用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細胞中。轉(zhuǎn)染 24 小時后,細胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。
對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/
30 毫升的 293F 細胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導入細胞表達,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。
轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具收錄于話題轉(zhuǎn)染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關(guān)鍵步驟。不同的實驗方案和技術(shù)差別巨大,我們可以利用化學方法或脂質(zhì)體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細胞內(nèi),也可以使用電穿孔方法利用電流在細胞膜上開孔,使核酸進入細胞內(nèi)。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染。如何選擇**受信賴的可用于轉(zhuǎn)染的系統(tǒng),是實驗結(jié)果的重要影響因素。原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。轉(zhuǎn)染試劑分裝
mRNA細胞&***轉(zhuǎn)染試劑來助力.動物轉(zhuǎn)染試劑原理
X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.動物轉(zhuǎn)染試劑原理
上海儒安生物科技有限公司一直專注于從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學品、監(jiān)控化學品、民用爆炸物品、易制毒化學品)、實驗窒設(shè)備的銷售。,是一家醫(yī)藥健康的企業(yè),擁有自己獨立的技術(shù)體系。目前我公司在職員工以90后為主,是一個有活力有能力有創(chuàng)新精神的團隊。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準則。公司致力于打造高品質(zhì)的細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體。一直以來公司堅持以客戶為中心、細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體市場為導向,重信譽,保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。