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斑馬魚尾部脫水皺縮模型是評(píng)估化妝品保濕性能的關(guān)鍵工具。其皮膚真皮層含水通道蛋白AQP3,與人類透明質(zhì)酸合成酶HAS3協(xié)同調(diào)控水分平衡。實(shí)驗(yàn)中,將斑馬魚胚胎置于高滲氯化鈉溶液中,尾部因脫水發(fā)生皺縮,通過顯微鏡測(cè)量尾部面積變化并檢測(cè)aqp3、has3基因表達(dá)量。例如,某糙米發(fā)酵濾液可使斑馬魚尾部面積縮小抑制率達(dá)65%,同時(shí)aqp3基因表達(dá)量提升2.3倍,證實(shí)其強(qiáng)的效保濕能力。該模型已被江蘇省特殊化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心等機(jī)構(gòu)納入標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程,成為保濕功效宣稱的重要依據(jù)。修復(fù)功效檢測(cè)表明,使用該面霜后皮膚屏障功能恢復(fù)速度提升40%。化妝品斑馬魚評(píng)價(jià)
皮膚外用產(chǎn)品的制造、運(yùn)輸和銷售需要事先進(jìn)行安全性評(píng)估,并評(píng)估可能因預(yù)期用途、誤用、或意外皮膚暴露而導(dǎo)致的皮膚反應(yīng)。離體皮膚的另一重要應(yīng)用是評(píng)估皮膚外用產(chǎn)品的安全性和功效性,這包括日用品、化妝品、藥品、醫(yī)療器械等。BURGHER等人使用腹部整形手術(shù)獲取的人體皮膚外植體研究了氫氟酸的腐蝕性,他們發(fā)現(xiàn)70%的氯氟酸在作用的5分鐘內(nèi)即可完全穿透皮膚,這與之前研究的意外氫氟酸暴露的臨床結(jié)果是一致的均。研究人員在OECDTG439標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)之上,開發(fā)了使用離體皮膚模型評(píng)估化合物是否具有潛在刺激性的方法。通過對(duì)120種化妝品刺激離體皮膚的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與人體斑貼實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比,發(fā)現(xiàn)離體皮膚模型檢測(cè)的特異性為89.9%,準(zhǔn)確率為89.1%[46]。此外,科研人員還使用彗星實(shí)驗(yàn)對(duì)手術(shù)獲得的離體皮膚進(jìn)行了化合物遺傳毒性的評(píng)估,通過將離體皮膚局部暴露于20中化學(xué)物質(zhì)中,他們發(fā)現(xiàn)其遺傳毒性檢測(cè)的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性分別為89%、90%和89%切。這些結(jié)果均表明離體皮膚是外用產(chǎn)品刺激性、腐蝕性、遺傳毒性等評(píng)價(jià)的可靠模型,具有廣泛的應(yīng)用前景。美白功效評(píng)測(cè)報(bào)告皮膚科醫(yī)生評(píng)估室配備專業(yè)設(shè)備,為化妝品安全性提供醫(yī)學(xué)診斷支持。
盡管用于化妝品評(píng)價(jià)的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展,但無(wú)論是斑馬魚模型、體外細(xì)胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實(shí)結(jié)構(gòu)與功能,這使得離體皮膚評(píng)價(jià)模型逐漸進(jìn)入人們的視野。離體皮膚也被稱為皮膚外植體,它是由人體來(lái)源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26]。離體皮膚通過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式,可在體外維持一定的組織活力,目前,已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測(cè)評(píng)、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機(jī)能的模型,包含完整的皮膚細(xì)胞類群如角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、黑素細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖等細(xì)胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨。本文將在下面章節(jié)重點(diǎn)概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用。
斑馬魚肥大細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能與人類相似,為抗過敏功效評(píng)價(jià)提供了體內(nèi)模型。實(shí)驗(yàn)通過N-苯甲酰-DL-精氨酸對(duì)硝基苯酰胺鹽酸鹽(BAPNA)底物法檢測(cè)類胰蛋白酶活性,定量評(píng)估過敏反應(yīng)強(qiáng)度。例如,某含燕麥生物堿的乳液可使斑馬魚胚胎類胰蛋白酶表達(dá)量降低58%,且過敏癥狀(如心率異常、運(yùn)動(dòng)遲緩)發(fā)生率減少72%。該方法基于肥大細(xì)胞脫顆粒釋放組胺的免疫機(jī)制,通過熒光定量PCR檢測(cè)過敏相關(guān)基因(如IL-4、IL-13)表達(dá)變化實(shí)現(xiàn)機(jī)制驗(yàn)證。相較于豚鼠皮膚致敏實(shí)驗(yàn),斑馬魚模型可避免個(gè)體差異導(dǎo)致的假陰性結(jié)果,且實(shí)驗(yàn)周期從42天縮短至7天。目前,完美、養(yǎng)生堂等企業(yè)已將斑馬魚抗過敏評(píng)價(jià)納入產(chǎn)品備案體系。敏感肌測(cè)試中,這款乳液通過刺激性功效檢測(cè),未引發(fā)任何紅斑或瘙癢反應(yīng)。
斑馬魚黑色素調(diào)控機(jī)制與人類高度保守,使其成為美白功效評(píng)價(jià)的“可視化工具”。實(shí)驗(yàn)通過向受精后24小時(shí)斑馬魚胚胎施加受試物,利用顯微成像技術(shù)定量分析體表黑色素含量變化。例如,某含煙酰胺的精華液可使斑馬魚胚胎黑色素含量降低42%,且效果與濃度呈劑量依賴關(guān)系。該方法基于酪氨酸酶催化黑色素合成的生化通路,通過圖像分析軟件(如ImageJ)實(shí)現(xiàn)高通量篩選。相較于人體實(shí)驗(yàn),斑馬魚模型可將檢測(cè)周期從28天縮短至72小時(shí),成本降低70%。目前,歐詩(shī)漫、華熙生物等企業(yè)已建立斑馬魚美白功效評(píng)價(jià)平臺(tái),并參與制定T/HPCIA 005-2022標(biāo)準(zhǔn)。然而,斑馬魚胚胎皮膚滲透性差異可能導(dǎo)致結(jié)果與人體差異,需結(jié)合3D皮膚模型驗(yàn)證。樣品室配備智能溫濕度監(jiān)控,確?;瘖y品功效成分在儲(chǔ)存環(huán)節(jié)的活性穩(wěn)定。化妝品 毒理學(xué)試驗(yàn)
溫和去痘認(rèn)證:通過丙酸桿菌抑制試驗(yàn),結(jié)合臨床觀察驗(yàn)證去痘效果?;瘖y品斑馬魚評(píng)價(jià)
創(chuàng)新和內(nèi)卷都已成為化妝品行業(yè)的熱詞,唯有具備差異化價(jià)值且價(jià)值能被消費(fèi)者感知和認(rèn)可的產(chǎn)品才能走出同質(zhì)化競(jìng)爭(zhēng)的窘境。以多維度生物技術(shù)應(yīng)用為基礎(chǔ),環(huán)特生物創(chuàng)造性地提出“循證功效”理念,從原料的機(jī)制和活性研究、配方的原料篩選和功效驗(yàn)證、有效成分的透皮吸收和產(chǎn)品功效評(píng)估等多個(gè)環(huán)節(jié)來(lái)研究具有創(chuàng)新性的產(chǎn)品,并通過產(chǎn)品微觀作用機(jī)理和宏觀真實(shí)功效的可視化呈現(xiàn)來(lái)進(jìn)行科學(xué)傳播的研究和創(chuàng)新。在產(chǎn)品開發(fā)過程中,通過對(duì)細(xì)胞、斑馬魚、3D皮膚模型、離體皮膚(皮膚外植體)模型和人體功效測(cè)評(píng)等多維技術(shù)的選擇和應(yīng)用,不僅有助于開發(fā)出功效明顯的產(chǎn)品,也能挖掘出產(chǎn)品的獨(dú)特價(jià)值和差異化賣點(diǎn),同時(shí)也能幫助企業(yè)將產(chǎn)品價(jià)值更有效地展示給消費(fèi)者,進(jìn)而幫助消費(fèi)者選擇更適合自己的產(chǎn)品?;瘖y品斑馬魚評(píng)價(jià)