如何測(cè)定的吸光度范圍?
通常，酶標(biāo)儀的吸光度測(cè)定范圍在0-2.5之間即可以滿足ELISA的測(cè)定要求。早期的酶標(biāo)儀可測(cè)定的吸光度一般在0-2.5之間，但現(xiàn)在基本上都做了拓寬，可達(dá)到3.5以上，并且能保持很好的精密度與線性。
對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍，主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道，亦有單通道)檢測(cè)，一般為硅光管或光導(dǎo)纖維，除測(cè)定通道外，有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道，每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何，均可通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定的吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來(lái)。光學(xué)系統(tǒng)好的話，則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳。測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
可見(jiàn)光和紫外光酶標(biāo)儀分別采用鎢燈及氘燈作為光源。廣東酶標(biāo)儀試用
酶標(biāo)儀有單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)檢測(cè)功能。有時(shí)使用者不知在什么情況下使用單或雙波長(zhǎng)檢測(cè)。所謂的“單波長(zhǎng)”就是使用一種對(duì)顯色具比較大吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定；而“雙波長(zhǎng)”則除了用對(duì)顯色具比較大吸收的波長(zhǎng)即450 nm或492 nm進(jìn)行比色測(cè)定外，同時(shí)用對(duì)特異顯色不敏感的波長(zhǎng)如630 nm進(jìn)行測(cè)定，酶標(biāo)儀打印出來(lái)的吸光度則為二者之差。630 nm波長(zhǎng)下得到的吸光度是非特異的，來(lái)自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此，在ELISA比色測(cè)定中，比較好使用雙波長(zhǎng)，且不必設(shè)空白孔。廣東酶標(biāo)儀試用光柵型濾光系統(tǒng)具有使用方便，可以進(jìn)行光譜掃描，靈活性等優(yōu)點(diǎn)。
熒光酶標(biāo)儀原理：
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過(guò)切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后，此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光，被測(cè)的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光，經(jīng)過(guò)單色器變成單色熒光后照射于測(cè)樣品用的光電倍增管上，由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過(guò)放大器放大輸至記錄儀，激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動(dòng)機(jī)帶動(dòng)的凸輪所控制，當(dāng)測(cè)繪熒光發(fā)射光譜時(shí)，將激發(fā)光單色器的光柵，固定在適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長(zhǎng)處，而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動(dòng)，將各波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度訊號(hào)輸出至記錄儀上，所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
寶予德K3 Plus酶標(biāo)儀為8通道垂直光路光密度檢測(cè)儀，其設(shè)計(jì)目的是執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)的光度測(cè)量。
K3 Plus酶標(biāo)儀的通用內(nèi)置軟件允許采用終點(diǎn)法及動(dòng)力學(xué)讀取模式。靈活的臨界值計(jì)算與曲線擬合算法，使K3 Plus酶標(biāo)儀在各種診斷應(yīng)用中數(shù)據(jù)操作的靈活性增強(qiáng)。擴(kuò)展內(nèi)存可以?xún)?chǔ)存多達(dá)500個(gè)測(cè)定方法。各軟件包為不同的測(cè)量與計(jì)算模式的結(jié)合（見(jiàn)4.2節(jié)）。各模式均采用自提示方式，從而減少誤差因子，簡(jiǎn)化操作。
**多使用濾光片輪內(nèi)的8個(gè)高質(zhì)量的干涉濾光片選擇波長(zhǎng)（400-750nm）。K3 Plus酶標(biāo)儀包括標(biāo)準(zhǔn)濾光片，如405nm、450nm、492nm及630nm的濾光片。
可以通過(guò)USB接口連接打印機(jī)接口對(duì)讀數(shù)進(jìn)行處理。
酶標(biāo)儀單波長(zhǎng)檢測(cè)是指在一個(gè)波長(zhǎng)下測(cè)量吸光度（也稱(chēng)為終點(diǎn)法）。
合適的軟件功能對(duì)于ELISA定量測(cè)定同樣很重要。有研究表明，四參數(shù)方程能較好地反映免疫測(cè)定的劑量反應(yīng)曲線，*為適合于定量酶免疫測(cè)定的曲線擬合。因此，如目的是定量測(cè)定，則在酶標(biāo)儀的軟件功能中，要有這種曲線回歸方程計(jì)算分析功能。其他諸如連點(diǎn)、直線等回歸計(jì)算，則可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定，如兼用于微量生化測(cè)定，則此類(lèi)回歸計(jì)算就很有必要。此外，酶標(biāo)儀兼做酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、凝集反應(yīng)測(cè)定所需的軟件是否應(yīng)具備，當(dāng)然也應(yīng)根據(jù)使用目的而定。由于此類(lèi)軟件一般都較為昂貴，酶標(biāo)儀常另外單獨(dú)按需配備，如果不是實(shí)驗(yàn)室特殊需要，就不必強(qiáng)求這種軟件功能。酶標(biāo)儀是一種用途比較廣的生物檢驗(yàn)醫(yī)療設(shè)備，利用酶聯(lián)免疫分析法,根據(jù)酶標(biāo)記原理，進(jìn)行定性或定量分析。廣東酶標(biāo)儀試用
酶標(biāo)儀是實(shí)驗(yàn)室常用的一種儀器，一般可以按照濾光方式的不同和功能的不同進(jìn)行劃分。廣東酶標(biāo)儀試用
酶標(biāo)儀與分光光度計(jì)區(qū)別：
(2)光路的方向：分光光度計(jì)是水平光路，而酶標(biāo)儀則是垂直光路。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過(guò),因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過(guò)待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過(guò)比色液。垂直光的特點(diǎn)是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小，不足之處是受被測(cè)樣本液面是否水平、酶標(biāo)板透光性、孔底是否平整等的影響較大。
(3)光路的長(zhǎng)度：由于光密度(OD值)與吸光系數(shù), 待測(cè)組分的濃度以及光路長(zhǎng)度成正比關(guān)系。分光光度計(jì)采用的比色杯的寬度通常是25px，所以光路長(zhǎng)度固定為25px。因此不同儀器，不同批次測(cè)量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性。而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路, 所以光路的長(zhǎng)度應(yīng)該是液體液面的高度，所以測(cè)得的值受到樣品的體積的影響。
廣東酶標(biāo)儀試用
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