GoldenView II吖啶橙核酸染料:高效、安全的核酸檢測選擇GoldenView II吖啶橙核酸染料是一種新型的花青類核酸染料,可有效替代傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB),廣泛應(yīng)用于核酸的檢測和染色。它在瓊脂糖凝膠電泳中表現(xiàn)出色,與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生強烈的熒光信號,靈敏度比EB高出5-10倍。工作原理GoldenView II通過與核酸的特異性結(jié)合發(fā)出熒光。與雙鏈DNA結(jié)合時,其熒光發(fā)射峰為530 nm,呈現(xiàn)綠色熒光;而與單鏈DNA或RNA結(jié)合時,發(fā)射峰為640 nm,呈現(xiàn)紅色熒光。這種特性使其不僅能用于DNA的檢測,還可用于RNA的染色。使用方法GoldenView II的使用方法與EB相似,但具有更高的靈敏度和安全性。在瓊脂糖凝膠電泳中,將染料加入凝膠溶液中,冷卻后倒膠并進行電泳。電泳結(jié)束后,可通過紫外透射儀或凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。優(yōu)勢與應(yīng)用GoldenView II的主要優(yōu)勢在于其高靈敏度和低毒性。與EB相比,它在紫外光下的熒光強度更高,背景更清晰。此外,它還可用于細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的染色,幫助研究細(xì)胞周期、凋亡和自噬等過程。GoldenView II廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實驗,如基因克隆、PCR產(chǎn)物分析和質(zhì)粒提取等。它不僅適用于常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳,還可用于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測。DL3000 DNA Marker是一種即用型產(chǎn)品,已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。浙江類人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)
DNA Marker II:高效、精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker II 是一種廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳的即用型DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),用于快速估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠為DNA分析提供清晰、準(zhǔn)確的分子量參考。產(chǎn)品特點組成:DNA Marker II 通常包含6-8條不同長度的DNA片段,覆蓋從100 bp到2000 bp的范圍。具體片段長度可能因品牌而異,但常見的片段包括100 bp、200 bp、500 bp、1000 bp和2000 bp。即用型設(shè)計:預(yù)混了1×Loading Buffer,無需額外添加,直接上樣,節(jié)省時間和操作步驟。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻,便于在紫外燈下觀察。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存6個月,長期保存建議置于-20℃,避免反復(fù)凍融。使用方法上樣量:建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-2.0%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5×TBE緩沖液,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融,以防止核酸酶污染導(dǎo)致條帶降解。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。畢赤酵母表達(dá)VLP技術(shù)服務(wù)開發(fā)這種設(shè)計使得DL2000在電泳過程中能夠清晰地顯示目標(biāo)DNA片段的大小,幫助研究人員快速判斷實驗結(jié)果。
在分子生物學(xué)實驗中,RNA的分離與分析是研究基因表達(dá)和調(diào)控的重要環(huán)節(jié)。BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)作為一種為RNA電泳設(shè)計的緩沖液,因其高效、穩(wěn)定且無核酸酶污染的特點,成為實驗室中不可或缺的工具。BPTE電泳緩沖液的主要成分包括PIPES、Tris和EDTA,這些成分共同作用,為RNA電泳提供了理想的環(huán)境。該緩沖液經(jīng)過0.1% DEPC處理,確保了無RNase污染,從而保護RNA樣品免受降解。其pH值約為6.5,適合RNA在電泳過程中的穩(wěn)定遷移。優(yōu)勢與特點無核酸酶污染:BPTE緩沖液經(jīng)過DEPC處理,確保無RNase污染,適合RNA樣品的電泳分析。高效分離:該緩沖液能夠提供穩(wěn)定的電泳條件,確保RNA條帶清晰、分辨率高。即用型設(shè)計:BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)為即用型溶液,無需額外配制,直接使用即可。廣適用性:適用于多種類型的RNA電泳實驗,包括小片段RNA和長片段RNA的分離。使用方法BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)可以直接用于制備瓊脂糖凝膠或作為電泳槽的緩沖液。使用時需注意以下幾點:確保所有實驗器材和試劑均經(jīng)過RNase-free處理。在電泳結(jié)束后,建議使用RNase-free的核酸染料進行染色,以避免RNA降解。
畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)在表達(dá)復(fù)雜蛋白質(zhì)時,可以采取多種優(yōu)化策略來提高表達(dá)效率和蛋白質(zhì)質(zhì)量。以下是一些具體的優(yōu)化策略:1.密碼子優(yōu)化:通過使用畢赤酵母偏好的密碼子,可以顯著提高蛋白產(chǎn)量,同時合理控制A+T的含量及分布,避免由于某些稀有密碼子的出現(xiàn)導(dǎo)致翻譯提前終止。2.啟動子選擇:選擇適用的啟動子有利于外源蛋白的高效合成,如AOX1基因的強誘導(dǎo)型啟動子PAOX1,可以通過更換不同的碳源實現(xiàn)細(xì)胞生長與外源蛋白合成的分離。3.信號肽篩選:N端信號肽的序列會影響蛋白易位進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的效率,通過修飾N-末端或去除額外的接頭肽可以提高外源蛋白分泌的效率。4.敲除蛋白酶基因:畢赤酵母胞內(nèi)或胞外存在蛋白酶,可能導(dǎo)致外源蛋白降解。通過敲除相關(guān)蛋白酶的基因,可以減少外源蛋白的降解風(fēng)險。5.共表達(dá)促折疊因子:共表達(dá)如分子伴侶PDI或轉(zhuǎn)錄因子Aft1等促折疊因子,可以提高重組蛋白的表達(dá)量和分泌效率。6.多拷貝數(shù)外源基因:插入多拷貝數(shù)的外源基因可以提高表達(dá)效率。7.發(fā)酵條件優(yōu)化:通過優(yōu)化發(fā)酵條件,如溫度、pH、碳源、溶氧等,可以提高外源蛋白的表達(dá)量和質(zhì)量。在必要時,添加蛋白保護劑,如甘油、蔗糖或其他穩(wěn)定劑,以增強膠原蛋白在純化過程中的穩(wěn)定性。
10×MOPSRNA緩沖液是一種專為RNA電泳設(shè)計的緩沖液,通常用于瓊脂糖凝膠電泳中。以下是關(guān)于10×MOPSRNA緩沖液的一些詳細(xì)信息:1.主要成分:-MOPS(3-(N-嗎啉代)丙磺酸):一種緩沖劑,提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,適合RNA電泳。-EDTA:螯合金屬離子,防止RNase酶的活性。-其他成分:可能包括一些鹽類,如醋酸鈉或硼酸,以維持適當(dāng)?shù)碾x子強度。2.用途:-用于RNA電泳,包括總RNA、mRNA、小RNA等的分離和分析。-適用于甲醛變性的或非變性的瓊脂糖凝膠電泳。3.特點:-溫和的pH環(huán)境:MOPS緩沖液的pH值通常在7.0左右,適合RNA的穩(wěn)定和遷移。-減少RNase污染:含有EDTA,有助于減少RNase酶的活性,保護RNA樣品。4.使用說明:-稀釋:在使用前,通常將10×MOPSRNA緩沖液稀釋至1×工作濃度。-制備凝膠:將瓊脂糖粉末與1×MOPSRNA緩沖液混合,加熱至瓊脂糖完全溶解,然后倒入凝膠模具中。-電泳:將RNA樣品與適當(dāng)?shù)纳蠘泳彌_液混合后,加入凝膠孔中,接通電源進行電泳。5.保存條件:-通常建議在室溫下保存,避免長時間暴露在空氣中,防止水分蒸發(fā)或污染。-也可以在4℃下保存,延長其穩(wěn)定性和使用壽命。Phusion Master Mix的是Phusion DNA聚合酶,開發(fā)的高保真酶,其錯誤率為Taq酶的1/50,Pfu酶的1/6。酶定向進化技術(shù)服務(wù)研發(fā)
由于HLC具有良好的生物相容性、低免疫原性、穩(wěn)定性和大規(guī)模生產(chǎn)的能力,它已被廣泛應(yīng)用于皮膚損傷。浙江類人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)
DL15000 DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由7條線狀雙鏈DNA片段組成,覆蓋從250 bp到15000 bp的范圍,能夠為大片段DNA的分析提供精確的參考。產(chǎn)品特點組成:DL15000 DNA Marker 包含7條DNA片段,分別為250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7500 bp、10000 bp和15000 bp。即用型設(shè)計:已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接上樣,無需額外處理。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長期保存,室溫下也能穩(wěn)定保存6個月。使用方法上樣量:建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用1%的瓊脂糖凝膠,電壓5 V/cm左右,電泳時間35-40分鐘。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,在紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。電泳緩沖液:及時更換電泳緩沖液并使用新制備的凝膠,以免影響電泳結(jié)果。浙江類人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)