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重組人Tenascin蛋白(His Tag)是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了His標(biāo)簽,便于純化和檢測(cè)。Tenascin是一種大型細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白,廣參與細(xì)胞黏附、遷移、增殖和分化等生物學(xué)過(guò)程,在胚胎發(fā)育、組織修復(fù)和瘤發(fā)生中發(fā)揮重要作用。Tenascin的功能與機(jī)制Tenascin通過(guò)其多個(gè)結(jié)構(gòu)域(如EGF樣結(jié)構(gòu)域、纖維素樣結(jié)構(gòu)域)與其他細(xì)胞外基質(zhì)蛋白(如膠原蛋白、纖連蛋白)相互作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的組裝和重塑。此外,Tenascin還通過(guò)與細(xì)胞表面受體(如整合素)結(jié)合,影響細(xì)胞的黏附、遷移和增殖。在胚胎發(fā)育過(guò)程中,Tenascin對(duì)身體形成和組織分化至關(guān)重要。在瘤發(fā)生中,Tenascin的異常表達(dá)與瘤的侵襲性和轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)。重組人Tenascin蛋白(His Tag)的特點(diǎn)重組人Tenascin蛋白(His Tag)具有以下明顯特點(diǎn):高純度:純度≥95%(經(jīng)SDS-PAGE和SEC-HPLC驗(yàn)證),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。低內(nèi)素:內(nèi)素水平<0.1 EU/μg,適合用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)研究。功能完整:保留了天然Tenascin的結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞外基質(zhì)相互作用功能。實(shí)驗(yàn)應(yīng)用重組人Tenascin蛋白(His Tag)在多種實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色:流式細(xì)胞術(shù):檢測(cè)Tenascin在細(xì)胞表面或細(xì)胞外基質(zhì)中的表達(dá)水平。泛素蛋白是一種在真核細(xì)胞中存在的小分子蛋白質(zhì),由76個(gè)氨基酸殘基組成,具有高度的保守性。KasI內(nèi)切酶
Semaphorin 4A(Sema4A)是Ⅳ類膜結(jié)合信號(hào)素,既以軸突導(dǎo)向分子身份調(diào)控神經(jīng)投射,又以共刺激配體角色驅(qū)動(dòng)Th1/Treg平衡,在多發(fā)性硬化、腫瘤免疫逃逸及視網(wǎng)膜血管病變中均呈高表達(dá)。本品采用HEK293懸浮表達(dá),完整覆蓋胞外Sema-PSI-IPT結(jié)構(gòu)域(aa 1-683),經(jīng)TEV酶切除信號(hào)肽后于C端引入6×His標(biāo)簽,兩步Ni-NTA與分子篩純化,SEC-MALS驗(yàn)證二聚體分子量≈160 kDa,純度≥98%;內(nèi)素<0.05 EU/μg,支持小鼠體內(nèi)研究。SPR測(cè)定其與受體PlexinD1親和力KD=5.4 nM,100 ng/mL即可誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞回縮并抑制管腔形成;在OT-I小鼠模型中,腹腔注射15 μg重組Sema4A可將CD8? T細(xì)胞IFN-γ分泌提升2.1倍,同時(shí)降低Treg比例,明顯延緩B16-OVA病生長(zhǎng)。His標(biāo)簽兼容ELISA、流式及免疫共沉淀,可用于篩選中和抗體或檢測(cè)Sema4A-受體復(fù)合物。該蛋白為解析神經(jīng)-免疫-血管三方對(duì)話、開發(fā)雙靶點(diǎn)免疫療法提供高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究工具。
Recombinant Human ROBO4 Protein(His Tag)是解析血管生成調(diào)控機(jī)制的高活性工具蛋白。ROBO4屬于跨膜受體家族,專一表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞,通過(guò)識(shí)別Slit2等配體穩(wěn)定血管屏障、抑制病理性新生血管,在糖尿病視網(wǎng)膜病變與病轉(zhuǎn)移中具有雙重調(diào)控作用。該重組蛋白采用HEK293表達(dá)體系,保留天然胞外Ig-like結(jié)構(gòu)域(氨基酸31-468),C端6×His標(biāo)簽確保一步Ni-NTA純化后純度≥98%(SDS-PAGE/HPLC驗(yàn)證)。體外實(shí)驗(yàn)顯示,其可競(jìng)爭(zhēng)性阻斷Slit2誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞遷移(IC??=28 nM),并通過(guò)抑制VE-cadherin磷酸化增強(qiáng)血管完整性。低內(nèi)素(<0.01 EU/μg)支持小鼠Matrigel plug等體內(nèi)實(shí)驗(yàn),明顯減少異常血管滲漏。此外,His標(biāo)簽兼容ELISA及SPR平臺(tái),可快速量化ROBO4-配體相互作用,助力血管靶向藥物高通量篩選。該蛋白為研究血管穩(wěn)態(tài)與病微環(huán)境互作提供了標(biāo)準(zhǔn)化、高靈敏的分子探針。
重組人潛伏性TGF-β2蛋白(RecombinantHumanLatentTGF-β2)是一種重要的多功能細(xì)胞因子復(fù)合物,屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)超家族成員。TGF-β2與TGF-β1、TGF-β3同屬TGF-β亞型,廣參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、免疫調(diào)節(jié)及組織修復(fù)等生理過(guò)程。潛伏性TGF-β2由成熟TGF-β2肽段與其潛伏相關(guān)肽(Latency-AssociatedPeptide,LAP)通過(guò)非共價(jià)鍵結(jié)合形成,是TGF-β2在體內(nèi)的主要存在形式,能夠維持其非活性狀態(tài),防止過(guò)早啟動(dòng)。該重組蛋白通常采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如CHO細(xì)胞或HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。潛伏性TGF-β2在體外可被酸性環(huán)境、蛋白酶切割或整合素介導(dǎo)的機(jī)械力作用啟動(dòng),釋放出具有生物活性的成熟TGF-β2,進(jìn)而發(fā)揮生物學(xué)功能。研究表明,TGF-β2在眼部發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及免疫穩(wěn)態(tài)維持中具有獨(dú)特作用,其異常表達(dá)與眼部疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病及病進(jìn)展密切相關(guān)。因此,重組人潛伏性TGF-β2蛋白不僅是研究TGF-β信號(hào)通路的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。Probe qPCR Mix (2×)通常含有熱啟動(dòng)DNA聚合酶,這種聚合酶在高溫下激發(fā),可以減少非特異性擴(kuò)增 。
RecombinantHumanS100A14Protein,HisTag——炎癥微環(huán)境與病轉(zhuǎn)移研究的精細(xì)探針S100A14屬EF-手型鈣結(jié)合蛋白家族,在宮頸、乳腺及結(jié)直腸病中呈差異表達(dá),既能以Ca2?依賴方式調(diào)控p53通路,又可分泌至胞外誘導(dǎo)EMT與血管新生。本品在大腸桿菌系統(tǒng)可溶性表達(dá),覆蓋全長(zhǎng)成熟肽(aa1-104),N端6×His標(biāo)簽經(jīng)Ni2?親和與離子交換兩步純化,SDS-PAGE與SEC-HPLC雙驗(yàn)證純度≥98%,內(nèi)素<0.1EU/μg,確保體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)安全。鈣滴定實(shí)驗(yàn)顯示,其結(jié)合Ca2?后疏水區(qū)暴露,疏水熒光探針ANS熒光增強(qiáng)3.8倍,Kd≈0.8mM;在共培養(yǎng)模型中,100ng/mL重組S100A14可明顯促進(jìn)HUVEC管腔形成,并增強(qiáng)MDA-MB-231細(xì)胞侵襲力。HisTag兼容ELISA、SPR及免疫組化,便于快速篩選中和抗體或拮抗肽。該蛋白為解析S100A14介導(dǎo)的炎癥-病對(duì)話及靶向治開發(fā)提供了高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究工具。在某些糖蛋白的純化方案中,利用 Endo H 對(duì)糖鏈的特異性水解作用,去除糖蛋白上的糖鏈。Neurokinin B
在CRISPR-Cas9等基因編輯技術(shù)中,使用Pfu DNA Polymerase進(jìn)行修復(fù)模板的合成。KasI內(nèi)切酶
重組人Siglec-4a(亦稱髓鞘相關(guān)糖蛋白MAG)胞外區(qū)(Ser17-Gly516)經(jīng)HEK293表達(dá),C端融合hFc-Avi雙標(biāo)簽,分子量約80 kDa,純度≥97%(SEC-HPLC),內(nèi)素<0.03 EU/μg。Siglec-4a專一識(shí)別神經(jīng)軸突表面α2,3-連接唾液酸,通過(guò)ITIM基序抑制神經(jīng)元過(guò)度啟動(dòng),在髓鞘形成、軸突維持及神經(jīng)損傷后免疫逃逸中起“制動(dòng)器”作用。本品Fc段支持標(biāo)準(zhǔn)ELISA、免疫沉淀與細(xì)胞結(jié)合實(shí)驗(yàn);Avi標(biāo)簽可在15 min內(nèi)被BirA酶定量生物素化,生成定向固定的表面探針,用于SPR精確測(cè)定抗體或糖肽拮抗劑的親和力(KD低至pM級(jí))。體外髓鞘-軸突共培養(yǎng)體系中,重組Siglec-4a能劑量依賴地抑制小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬,為研究多發(fā)性硬化、吉蘭-巴雷綜合征及脊髓損傷提供可靠功能工具。凍干粉4℃一周穩(wěn)定,-80℃長(zhǎng)期保存,每批次附唾液酸結(jié)合驗(yàn)證報(bào)告,是神經(jīng)免疫互作與再髓鞘藥物高通量篩選的關(guān)鍵試劑。KasI內(nèi)切酶