GTBE電泳緩沖液(1×):高效分離DNA片段的科研利器GTBE電泳緩沖液(1×)是一種專為DNA電泳設計的緩沖液,廣應用于分子生物學實驗中,尤其適用于分離相對較小的DNA片段(小于2000bp)。其主要成分包括甘氨酸、TBE(Tris-硼酸-EDTA)緩沖液。產(chǎn)品特點與優(yōu)勢高效分離能力:GTBE緩沖液的緩沖能力較弱,但特別適合分離小于2000bp的DNA片段,能夠提供清晰的電泳條帶。兼容性高:該緩沖液可用于常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳,也可用于脈沖場凝膠電泳,滿足多種實驗需求。穩(wěn)定性強:GTBE電泳緩沖液(1×)在室溫下保存,有效期可達12個月,使用方便。使用方法制備凝膠:使用1×GTBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。加樣與電泳:將樣品加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中,進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用合適的核酸染料(如EB或GoldView)對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。注意事項安全操作:為確保實驗安全,操作時需佩戴實驗服和一次性手套。保存條件:產(chǎn)品應保存于室溫,避免長時間暴露在高溫或強光下。使用期限:GTBE電泳緩沖液(1×)的有效期為12個月,建議在開封后盡快使用。它不僅適用于常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳,還可用于基因克隆、PCR產(chǎn)物分析和質(zhì)粒提取等實驗。浙江人源膠原蛋白技術服務技術服務
ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一種一步法反轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR(qRT-PCR)的預混液,主要用于RNA的特異性超高靈敏度定量檢測。以下是它的一些主要特點:1.一步法操作:該試劑盒整合了反轉(zhuǎn)錄和PCR步驟,簡化了操作流程,減少了操作時間,并限度地減少了人為誤差和污染風險。2.高靈敏度檢測:能夠檢測低至10個拷貝的目標序列,適合于低豐度RNA的檢測。3.多重檢測能力:可以在單個反應孔中進行多重檢測,不同基因?qū)煌结?,不同探針對應不同熒光標記,進行多重熒光定量PCR檢測。4.高特異性:通過使用TaqMan探針,該試劑盒提供了高特異性的檢測,可以區(qū)分有單個核苷酸差異的miRNA。5.熱啟動酶:使用的BeyoFast?TaqDNAPolymerase是一種與抗體結合的熱啟動酶,有效避免非特異性擴增,提高PCR反應的特異性、靈敏度和定量檢測的準確性。6.兼容多種熒光定量PCR儀:提供了LowROX和HighROX,兼容于無需ROX和需要LowROX或HighROX作為校正染料的熒光定量PCR儀。安徽大腸桿菌表達病毒樣顆粒技術服務重組蛋白將不同的DNA序列利用基因工程技術組合起來,使其在細胞中表達出可定制的蛋白質(zhì)。
在實驗室中使用Thioredoxin-NP-27腸激酶底物時,應遵循以下步驟:1.稀釋底物:首先,使用反應緩沖液(ReactionBuffer)將Thioredoxin-NP-27稀釋至0.1mg/ml。2.準備反應體系:取數(shù)個離心管,每個管中加入40μL稀釋后的Thioredoxin-NP-27溶液。3.添加腸激酶:然后,根據(jù)實驗設計,向每個離心管中加入不同量的腸激酶溶液,例如0μL、2μL、3μL等,以評估不同酶量對底物的切割效果。4.補充反應緩沖液:根據(jù)加入的腸激酶溶液量,相應減少反應緩沖液的量,以保持總體積不變。5.進行酶切反應:將離心管置于37℃±0.5℃水浴中,反應16小時。6.終止反應:反應結束后,向每個反應管中加入50μL的2×SDS凝膠加樣緩沖液,以終止酶切反應。7.電泳分析:取出各反應液20μL,進行SDS-PAGE凝膠電泳,以觀察酶切效果。8.計算腸激酶活性:根據(jù)GB/T41907-2022標準,按照提供的公式計算腸激酶活性,單位為腸激酶活性單位每毫克蛋白或固含物(U/mg)。9.保存條件:Thioredoxin-NP-27應在-30~-15℃保存,運輸時溫度應≤0℃。
DNA Marker I Plus:精細的DNA分子量標準DNA Marker I Plus 是一種即用型的DNA分子量標準,廣應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小和進行粗略定量。它由7條線狀雙鏈DNA條帶組成,覆蓋100 bp至700 bp的范圍,特別適合用于小片段DNA的分析。產(chǎn)品特點組成:包含100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp的DNA條帶,其中400 bp條帶加亮顯示。即用型設計:已預混1×Loading Buffer,使用時無需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存三個月,長期保存建議置于-20℃。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融,以防止核酸酶污染導致條帶降解。避免加熱:使用前無需加熱,直接上樣。電泳緩沖液:及時更換電泳緩沖液,使用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用Goldview等染料,由于靈敏度較低,建議適當增加Marker的上樣量。應用場景DNA Marker I Plus 適用于常規(guī)PCR產(chǎn)物、基因組DNA片段等的大小鑒定,特別適合需要精確測定DNA片段大小的實驗,如基因編輯驗證、小片段插入/缺失分析等。DL3000 DNA Marker憑借其準確的分子量范圍、清晰的條帶和便捷的操作,成為分子生物學實驗中不可或缺的工具。
畢赤酵母(Pichiapastoris)表達服務在臨床前研究中具有重要應用,主要得益于其多項優(yōu)勢,包括遺傳操作方便、適合高密度發(fā)酵、能夠進行蛋白的翻譯后修飾等。以下是畢赤酵母表達服務的關鍵點,以及它們?nèi)绾沃С峙R床前研究:1.高效表達系統(tǒng):畢赤酵母表達系統(tǒng)能夠有效表達多種外源蛋白,如人胰島素前體,并且可以通過優(yōu)化啟動子和碳源來提高產(chǎn)量和簡化工藝。2.翻譯后修飾:與其他表達系統(tǒng)相比,畢赤酵母能夠進行類似高等真核生物的信號肽剪切、二硫鍵形成、糖基化等過程的翻譯后蛋白加工,這對于許多性蛋白尤其重要。3.高密度發(fā)酵:畢赤酵母適合進行高密度發(fā)酵,這有助于提高產(chǎn)量并降低成本,適合生物制藥業(yè)的應用。4.重組蛋白的分泌表達:畢赤酵母可以分泌表達重組蛋白,如IL-10/Fc融合蛋白,這有助于提高蛋白的穩(wěn)定性和活性。5.透皮功能研究:畢赤酵母表達的融合蛋白,如TD-1/IL-10/Fc,可以用于研究透皮給藥的方式,這對于藥物的局部具有潛在價值。6.大規(guī)模蛋白生產(chǎn):畢赤酵母表達系統(tǒng)可以用于大規(guī)模生產(chǎn)重組蛋白,如顆粒溶解素,其表達量可達100mg/L。使用如高效液相色譜(HPLC)、毛細管電泳(CE-SDS)、質(zhì)譜等技術,評估蛋白的純度和均一性。江蘇支持IND的GMP蛋白生產(chǎn)技術服務開發(fā)
50×TAE液體應保存在室溫或4℃條件下,避免長時間暴露在高溫或強光下。浙江人源膠原蛋白技術服務技術服務
在大腸桿菌中表達VLP(病毒樣顆粒)時,確保蛋白質(zhì)的純度和活性是至關重要的。以下是一些關鍵步驟和技術:1.選擇正確的表達載體:使用能夠高效表達目標蛋白的質(zhì)粒載體,并確保含有適當?shù)膯幼雍蜆撕灒ㄈ鏗is標簽、GST標簽等)以便于后續(xù)的純化和檢測。2.優(yōu)化培養(yǎng)條件:調(diào)整培養(yǎng)條件,如溫度、pH、誘導劑濃度和培養(yǎng)時間,以化蛋白的可溶性表達和活性。3.細胞裂解:使用溫和的裂解方法,如超聲波或酶裂解,以保持蛋白的活性并減少非特異性的蛋白質(zhì)降解。4.親和層析:利用融合標簽(如His標簽)進行一步或多步親和層析,以高效地從細胞裂解物中純化目標蛋白。5.離子交換層析:通過離子交換層析進一步去除親和層析中未去除的雜質(zhì),提高蛋白的純度。6.分子排阻層析(SEC):使用SEC來確保產(chǎn)品是均一的蛋白質(zhì),去除多聚體和大分子雜質(zhì)。7.活性檢測:通過生物化學或生物物理方法(如ELISA、WB、酶活性測定、圓二色譜CD等)來評估蛋白的活性和構象。8.避免蛋白聚集:在表達和純化過程中,通過添加穩(wěn)定劑(如甘油、蔗糖)和使用低溫操作來防止蛋白聚集。浙江人源膠原蛋白技術服務技術服務