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Semaphorin 4A(Sema4A)是Ⅳ類膜結(jié)合信號素,既以軸突導(dǎo)向分子身份調(diào)控神經(jīng)投射,又以共刺激配體角色驅(qū)動(dòng)Th1/Treg平衡,在多發(fā)性硬化、腫瘤免疫逃逸及視網(wǎng)膜血管病變中均呈高表達(dá)。本品采用HEK293懸浮表達(dá),完整覆蓋胞外Sema-PSI-IPT結(jié)構(gòu)域(aa 1-683),經(jīng)TEV酶切除信號肽后于C端引入6×His標(biāo)簽,兩步Ni-NTA與分子篩純化,SEC-MALS驗(yàn)證二聚體分子量≈160 kDa,純度≥98%;內(nèi)素<0.05 EU/μg,支持小鼠體內(nèi)研究。SPR測定其與受體PlexinD1親和力KD=5.4 nM,100 ng/mL即可誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞回縮并抑制管腔形成;在OT-I小鼠模型中,腹腔注射15 μg重組Sema4A可將CD8? T細(xì)胞IFN-γ分泌提升2.1倍,同時(shí)降低Treg比例,明顯延緩B16-OVA病生長。His標(biāo)簽兼容ELISA、流式及免疫共沉淀,可用于篩選中和抗體或檢測Sema4A-受體復(fù)合物。該蛋白為解析神經(jīng)-免疫-血管三方對話、開發(fā)雙靶點(diǎn)免疫療法提供高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究工具。
在現(xiàn)代替物技術(shù)的舞臺上,限制性核酸內(nèi)切酶AccI是一位備受矚目的“明星”。它是一種能夠特異性識別并切割DNA的酶,憑借其精細(xì)的切割能力,在基因工程領(lǐng)域扮演著不可或缺的角色。AccI的識別序列是“GT^AC”,這意味著它會在DNA雙鏈上找到這一特定的核苷酸序列,并在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷。這種切割方式非常獨(dú)特,它會產(chǎn)生黏性末端,即切割后的DNA片段兩端會暴露出一段互補(bǔ)的單鏈區(qū)域。這種黏性末端的特性使得AccI在基因克隆和重組DNA技術(shù)中大顯身手。在基因工程中,科學(xué)家們常常需要將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中分離出來,并將其插入到合適的載體中。AccI可以像一把“精細(xì)刻刀”一樣,將目標(biāo)基因和載體DNA在特定位置切割,暴露出的黏性末端能夠通過堿基互補(bǔ)配對的方式相互結(jié)合,再利用DNA連接酶將它們連接起來,從而構(gòu)建出重組DNA分子。AccI的應(yīng)用不僅局限于基因克隆,它還在基因分析和診斷中發(fā)揮著重要作用。通過AccI對DNA的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,幫助診斷某些遺傳性疾病。此外,AccI還可以用于構(gòu)建基因文庫,為研究基因功能和進(jìn)化提供了重要的工具。AccI的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)發(fā)展的重要里程碑。 Recombinant Mouse Her3/ErbB3 Protein,His Tag在基因工程中,AciI酶的精細(xì)切割能力被廣應(yīng)用于基因克隆和重組DNA的構(gòu)建。
重組人Siglec-15(Recombinant Human Siglec-15)是一種經(jīng)HEK293細(xì)胞表達(dá)、C端融合His標(biāo)簽的跨膜唾液酸結(jié)合凝集素,分子量約35 kDa,純度≥95%(SDS-PAGE & SEC-HPLC),內(nèi)素<0.1 EU/μg。該蛋白在瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞、髓系抑制細(xì)胞及多種實(shí)體瘤表面高表達(dá),通過與未知唾液酸化配體結(jié)合,啟動(dòng)DAP12-Syk通路,抑制T細(xì)胞增殖并促進(jìn)PD-L1非依賴性免疫逃逸。本品保留天然N-糖基化位點(diǎn),可在體外重建“Siglec-15-Fc”或“Siglec-15-His”功能復(fù)合物,用于SPR、BLI測定與小分子、抗體或CAR結(jié)構(gòu)的親和力;亦可包板于ELISA,高通量篩選阻斷型抗體。凍干粉經(jīng)0.22 μm過濾除菌,復(fù)溶后4℃穩(wěn)定一周,-80℃長期儲存避免反復(fù)凍融。配套提供生物素化版本(Biotin-Siglec-15),兼容鏈霉親和素磁珠,實(shí)現(xiàn)瘤浸潤免疫細(xì)胞的原位捕獲與單細(xì)胞測序。每批次均通過阻斷實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證活性,附完整COA,是研究腫瘤免疫抑制機(jī)制與開發(fā)下一代免疫檢查點(diǎn)抑制劑的關(guān)鍵試劑。
重組人LAMP5蛋白(RecombinantHumanLAMP5Protein,HisTag)是一種重要的溶酶體相關(guān)膜蛋白,屬于LAMP家族成員,主要表達(dá)于免疫細(xì)胞,尤其是樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中。LAMP5(Lysosome-AssociatedMembraneProtein5)在抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)及細(xì)胞自噬等過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,是近年來免疫學(xué)及細(xì)胞生物學(xué)研究的熱點(diǎn)分子之一。該重組蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Westernblot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,LAMP5在調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、參與溶酶體功能及維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中具有重要作用。其表達(dá)異常與多種免疫相關(guān)疾病及病的發(fā)長發(fā)展密切相關(guān)。因此,重組人LAMP5蛋白不僅是研究溶酶體功能及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。
可溶性CD23(sCD23)是低親和力IgE受體FcεRII經(jīng)ADAM10剪切后釋入血循環(huán)的免疫調(diào)節(jié)肽,在過敏、B細(xì)胞活化及單核因子釋放中扮演“雙刃劍”。本品采用HEK293 真核表達(dá),覆蓋完整胞外凝集素頭部(aa 48-321),C端6×His標(biāo)簽經(jīng)Ni-NTA與分子篩雙重純化,SDS-PAGE與SEC-MALS證實(shí)單體均一,純度≥99%,內(nèi)素<0.05 EU/μg,滿足體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。ELISA顯示其與單體IgE親和力為KD=6.2 nM,可阻斷IgE-FcεRI交聯(lián)誘導(dǎo)的肥大細(xì)胞脫顆粒(IC??=25 ng/mL)。在PBMC模型中,50 ng/mL重組sCD23明顯上調(diào)IL-10、抑制TNF-α,提示抗?jié)撃?。His Tag兼容SPR、流式及免疫共沉淀,支持高通量篩選sCD23-整合素或CD21阻斷劑。該蛋白為闡釋過敏炎癥轉(zhuǎn)換節(jié)點(diǎn)及開發(fā)靶向IgE軸療法提供高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究級試劑。AccI 的識別序列是“GT^AC”,這意味著它會在 DNA 雙鏈上找到這一特定的核苷酸序列。Recombinant Human NKG2A&CD94 Protein,mFc Tag
來源于Francisella tularensis:FnCas12a是一種來源于Francisella tularensis菌株的核酸內(nèi)切酶。Recombinant Mouse FcRn Protein,His Tag
在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 ApaI 便是其中一位“精細(xì)切割手”。它以其高度的特異性和精細(xì)的切割能力,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及遺傳學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。ApaI 的識別序列是“GGG^CCC”,這一序列在基因組中相對罕見,使得 ApaI 能夠在特定位置進(jìn)行切割。它會在識別到該序列后,在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種切割方式使得 ApaI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢。在基因工程中,ApaI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而 ApaI 的黏性末端特性正好滿足了這一需求。ApaI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 ApaI 對不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,ApaI 可以用來檢測基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。Recombinant Mouse FcRn Protein,His Tag