ROX原理:主要用于熒光定量 PCR 中的校正和歸一化。在反應體系中,ROX 的熒光強度相對穩(wěn)定,不受 PCR 反應過程的影響。通過檢測 ROX 的熒光信號,可以對其他熒光染料的信號進行校正,消除由于加樣誤差、反應體積差異、儀器波動等因素引起的熒光信號變化,提高定量結果的準確性和可靠性。特點:激發(fā)波長約為 570nm,發(fā)射波長約為 590nm,熒光顏色為紅色。ROX 通常與其他熒光染料如 FAM、VIC 等配合使用,在多重熒光定量 PCR 中,為每個反應孔提供一個穩(wěn)定的內參熒光信號,以便對不同孔之間的熒光信號進行標準化處理。一些先進的 TET 熒光定量 PCR 儀采用了冷 CCD(電荷耦合器件)或 PMT(光電倍增管)作為熒光探測器;揚州 ROX熒光定量PCR儀代理商
熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點,被廣泛應用于多個行業(yè),以下是一些主要的應用行業(yè):食品行業(yè)食品安全檢測:可檢測食品中的致病微生物,如大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等,以及食品中的轉基因成分,保障食品安全,維護消費者的健康權益。食品溯源:通過對食品中特定 DNA 序列的檢測和分析,實現對食品原料的來源追溯和產品質量的全程監(jiān)控,有助于建立健全食品質量安全追溯體系。環(huán)境監(jiān)測行業(yè)微生物群落分析:對環(huán)境樣品中的微生物進行定量分析和群落結構研究,了解不同環(huán)境中微生物的種類、數量和分布規(guī)律,評估環(huán)境質量和生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。污染物降解菌檢測:篩選和檢測環(huán)境中具有污染物降解能力的微生物菌株,為生物修復技術提供理論依據和菌種資源,推動環(huán)境污染治理和生態(tài)修復工作的開展。揚州VIC熒光定量PCR儀價格多少在多重 PCR 反應中對不同的目標序列進行特異性標記和檢測。
熒光染料法原理:一些熒光染料(如 SYBR Green I)能特異性地結合到雙鏈 DNA 上。在 PCR 反應體系中,隨著 DNA 擴增產物的不斷增加,與雙鏈 DNA 結合的熒光染料也越來越多,熒光信號強度與 PCR 產物的數量呈正相關。通過檢測熒光信號的強度變化,就可以實時監(jiān)測 PCR 反應的進程。過程:在 PCR 反應的每一個循環(huán)中,當溫度降低到退火溫度時,引物與模板結合,DNA 聚合酶開始延伸引物,合成新的 DNA 鏈。此時,熒光染料會結合到新合成的雙鏈 DNA 上,儀器會在特定的時間點檢測熒光信號的強度。隨著循環(huán)次數的增加,熒光信號逐漸增強,當信號強度達到設定的閾值時,對應的循環(huán)數被稱為閾值循環(huán)數(Ct 值)。定量依據:在一定的范圍內,起始模板量與 Ct 值呈對數關系。即起始模板量越多,達到閾值所需的循環(huán)數越少,Ct 值越??;反之,起始模板量越少,Ct 值越大。通過已知濃度的標準品建立標準曲線,再根據待測樣本的 Ct 值,就可以在標準曲線上計算出其對應的起始模板量。
杭州柏恒熒光定量Q9600Pro在醫(yī)療機構中廣泛應用于病原體的檢測、遺傳篩查、傳染病和診斷等領域,發(fā)揮著關鍵的作用。其高靈敏度、高準確性和高通量的特點為醫(yī)療人員提供了可靠的檢測工具,幫助他們快速、精細地進行各種臨床檢測和診斷工作。在病原體檢測方面,杭州柏恒Q9600Pro可用于檢測各類細菌、病毒、等病原體的核酸,對于快速診斷性疾病具有重要意義。醫(yī)療機構可以利用該儀器進行檢測流感病毒、肺炎支原體、結核分枝桿菌等病原體,在疾病早期進行準確診斷和及時,有效控制傳染病的傳播。在遺傳篩查方面,杭州柏恒Q9600Pro可用于檢測遺傳性疾病的相關基因變異,幫助醫(yī)療機構進行遺傳咨詢和風險評估。通過PCR技術,可以快速準確地篩查出遺傳病患者,為患者提供個性化的方案和遺傳咨詢服務,提高疾病的預防和水平。在傳染病和診斷方面,杭州柏恒Q9600Pro的高靈敏度和高準確性使其成為臨床診斷的重要輔助工具。醫(yī)療機構可以利用該儀器進行各種傳染病的快速檢測,如、毒等,及時進行診斷和。對于診斷,Q9600Pro可用于檢測相關基因的突變和表達水平,幫助醫(yī)療人員制定個性化的方案,提高患者的生存率和效果。強度高且穩(wěn)定的光源能保證 TET 染料被充分激發(fā),而高靈敏度、低噪聲的探測器可準確捕捉微弱熒光信號。
熒光定量 PCR 儀的檢測結果會受到多種因素的影響,包括儀器設備、試劑質量、樣本處理以及實驗操作等方面,以下是具體介紹:樣本處理因素樣本采集:樣本采集的部位、時間和方法不當都可能影響檢測結果。例如,采集的樣本量不足、未采集到病變部位的細胞,或者樣本被污染,都可能導致檢測到的目標核酸含量不準確,出現假陰性或假陽性結果。核酸提取:核酸提取的質量和效率直接關系到后續(xù)檢測。提取過程中若核酸被降解,會使模板量減少,導致定量結果偏低。此外,提取的核酸中若含有蛋白質、多糖等雜質,也會抑制 PCR 反應,影響擴增效果和檢測結果的準確性。檢測微生物的特異性核酸序列,實現對食品中微生物的定量分析,及時發(fā)現食品中的微生物污染問題。鎮(zhèn)江SYBR-Green熒光定量PCR儀價格多少
若溫度控制不準確,會導致 PCR 反應效率降低、特異性下降,產生非特異性擴增,影響熒光信號準確性;揚州 ROX熒光定量PCR儀代理商
多重熒光定量 PCR:在同一反應體系中同時檢測多個目標基因時,VIC 熒光染料可與其他不同發(fā)射波長的熒光染料(如 FAM、ROX 等)組合使用。由于 VIC 的光譜特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號之間的相互干擾,從而實現對多個不同目標基因的同時定量分析。例如,在疾病診斷中,可同時檢測多個與疾病相關的基因標志物,提高診斷的準確性和全面性。SNP 基因分型:在單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測中,通過設計特定的引物和探針,利用 VIC 熒光染料標記不同等位基因的探針。在 PCR 反應過程中,根據不同等位基因與探針的特異性結合,產生不同的熒光信號,從而實現對 SNP 位點的分型。這種方法具有較高的準確性和靈敏度,可用于疾病關聯(lián)研究、藥物遺傳學研究以及個體遺傳特征分析等領域。揚州 ROX熒光定量PCR儀代理商