熒光定量 PCR 儀應(yīng)用領(lǐng)域:醫(yī)學(xué)檢測病原體檢測:可快速準(zhǔn)確地檢測血液、體液或組織樣本中的病原體 DNA 或 RNA,如乙肝病毒、丙肝病毒、病毒、等,為性疾病的早期診斷和防控提供有力支持。遺傳病診斷:檢測與遺傳性疾病相關(guān)基因的突變,輔助臨床診斷和遺傳咨詢,如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等疾病的基因檢測。食品安全:致病菌檢測:檢測食品中的沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等致病菌,確保食品安全。轉(zhuǎn)基因成分檢測:對食品中的轉(zhuǎn)基因成分進行定性和定量分析,保障消費者的知情權(quán)和選擇權(quán)。對于一些難以培養(yǎng)或培養(yǎng)周期較長的細菌,熒光定量 PCR 儀可以快速檢測其特定的核酸序列,實現(xiàn)早期診斷。江蘇EVA-Green熒光定量PCR儀電話
光學(xué)系統(tǒng):包括光源、激發(fā)和發(fā)射濾光片、檢測器等。光源提供激發(fā)熒光染料所需的能量,濾光片用于選擇特定波長的光,檢測器負(fù)責(zé)檢測熒光信號的強度。如 ABI StepOne Plus 實時熒光定量 PCR 儀的光學(xué)系統(tǒng)能精確檢測不同熒光染料發(fā)出的信號。熱循環(huán)系統(tǒng):用于控制 PCR 反應(yīng)的溫度變化,包括變性、退火和延伸等步驟。它需要具備快速升降溫的能力,以保證 PCR 反應(yīng)的高效進行。例如,Roche LightCycler 480 實時熒光定量 PCR 儀的熱循環(huán)系統(tǒng)升溫速度快,能有效縮短實驗時間??刂葡到y(tǒng):負(fù)責(zé)儀器的操作和數(shù)據(jù)處理,可設(shè)置 PCR 反應(yīng)的參數(shù),如循環(huán)次數(shù)、溫度、時間等,還能對檢測到的熒光信號進行分析和處理,生成定量結(jié)果。鎮(zhèn)江Cy5熒光定量PCR儀型號具有準(zhǔn)確的溫度控制系統(tǒng),確保 PCR 反應(yīng)在不同的溫度階段精確進行,以保證 TET 染料在合適的條件下發(fā)揮作用。
熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點,被廣泛應(yīng)用于多個行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):食品行業(yè)食品安全檢測:可檢測食品中的致病微生物,如大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等,以及食品中的轉(zhuǎn)基因成分,保障食品安全,維護消費者的健康權(quán)益。食品溯源:通過對食品中特定 DNA 序列的檢測和分析,實現(xiàn)對食品原料的來源追溯和產(chǎn)品質(zhì)量的全程監(jiān)控,有助于建立健全食品質(zhì)量安全追溯體系。環(huán)境監(jiān)測行業(yè)微生物群落分析:對環(huán)境樣品中的微生物進行定量分析和群落結(jié)構(gòu)研究,了解不同環(huán)境中微生物的種類、數(shù)量和分布規(guī)律,評估環(huán)境質(zhì)量和生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。污染物降解菌檢測:篩選和檢測環(huán)境中具有污染物降解能力的微生物菌株,為生物修復(fù)技術(shù)提供理論依據(jù)和菌種資源,推動環(huán)境污染治理和生態(tài)修復(fù)工作的開展。
熒光定量 PCR 儀的檢測結(jié)果會受到多種因素的影響,包括儀器設(shè)備、試劑質(zhì)量、樣本處理以及實驗操作等方面,。加樣準(zhǔn)確性:在配制反應(yīng)體系和加樣過程中,移液器的使用不準(zhǔn)確會導(dǎo)致試劑和樣本的加入量出現(xiàn)偏差。例如,加樣量過多或過少都會影響反應(yīng)體系中各成分的濃度,進而影響擴增效率和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。反應(yīng)體系配制:反應(yīng)體系中各成分的比例要準(zhǔn)確配制。如果引物、探針、酶、dNTP 等成分的濃度過高或過低,都會影響 PCR 反應(yīng)的特異性和效率,導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。此外,反應(yīng)體系中若存在氣泡,可能會影響熱傳遞和熒光信號的檢測。實驗環(huán)境:實驗環(huán)境的溫度、濕度等條件也會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。例如,環(huán)境溫度過高或過低可能影響酶的活性和反應(yīng)速率,濕度較大可能導(dǎo)致試劑吸潮變質(zhì),從而影響檢測結(jié)果的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。TET 的激發(fā)波長和發(fā)射波長使其能夠在特定的熒光通道中被準(zhǔn)確檢測到,通常其激發(fā)波長在 520 - 550nm 左右;
熒光定量 PCR 儀是一種精密的儀器,正確的維護和保養(yǎng)可以延長其使用壽命,保證儀器的性能和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。定期維護:光路系統(tǒng)校準(zhǔn):根據(jù)儀器的使用頻率和廠家建議,定期對光路系統(tǒng)進行校準(zhǔn),以確保熒光信號檢測的準(zhǔn)確性。校準(zhǔn)過程通常需要使用標(biāo)準(zhǔn)熒光樣品和專業(yè)的校準(zhǔn)工具,由專業(yè)技術(shù)人員進行操作。溫度校準(zhǔn):熒光定量 PCR 儀的溫度準(zhǔn)確性對實驗結(jié)果至關(guān)重要。定期使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計或溫度校準(zhǔn)設(shè)備對反應(yīng)模塊的溫度進行校準(zhǔn),確保各個孔位的溫度均勻性和準(zhǔn)確性符合要求。一般建議每 3 - 6 個月進行一次溫度校準(zhǔn)。更換耗材和部件:根據(jù)儀器的使用情況,定期更換易損耗材,如反應(yīng)板、密封墊、移液器吸頭等。對于一些關(guān)鍵部件,如熒光檢測模塊的燈泡、濾光片等,按照廠家規(guī)定的使用壽命進行更換,以保證儀器的性能穩(wěn)定。軟件更新:及時更新儀器的控制軟件和數(shù)據(jù)分析軟件,以獲得更好的性能和功能,同時修復(fù)可能存在的軟件漏洞。在更新軟件前,要備份好重要的實驗數(shù)據(jù),防止數(shù)據(jù)丟失。升降溫速度慢則會使實驗時間延長,也可能影響擴增效率。無錫TET熒光定量PCR儀價格
反應(yīng)體系配置:配置反應(yīng)體系時,需確保各試劑充分混合均勻,避免局部濃度不均影響反應(yīng)進行。江蘇EVA-Green熒光定量PCR儀電話
以下是判斷熒光定量 PCR 儀光路系統(tǒng)是否需要校準(zhǔn)的方法:熔解曲線異常峰形改變:熔解曲線的峰形變得不規(guī)則、寬化或出現(xiàn)多個峰,而樣品和實驗條件均無變化時,可能是光路系統(tǒng)對熒光信號的檢測精度下降,導(dǎo)致熔解曲線的分析結(jié)果不準(zhǔn)確,此時需要考慮對光路系統(tǒng)進行校準(zhǔn)。Tm 值偏移:熔解曲線的 Tm 值(解鏈溫度)與預(yù)期值相比出現(xiàn)明顯偏移,且排除了引物設(shè)計、反應(yīng)條件等因素的影響,可能是光路系統(tǒng)的熒光檢測存在誤差,影響了對 DNA 雙鏈解鏈過程的準(zhǔn)確監(jiān)測,需要對光路進行檢查和校準(zhǔn)。江蘇EVA-Green熒光定量PCR儀電話