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杭州博測(cè)材料科技有限公司2025-08-19
CLSM的關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)在于其空間濾波能力。它通過(guò)在檢測(cè)光路中放置一個(gè)共聚焦孔，精細(xì)地阻擋來(lái)自焦平面以外的散射光和熒光信號(hào)。這意味著在任何給定時(shí)刻，探測(cè)器只收集到物鏡焦點(diǎn)處一個(gè)極微小點(diǎn)的信息。通過(guò)逐點(diǎn)掃描整個(gè)焦平面，再逐層改變焦距進(jìn)行Z軸掃描，計(jì)算機(jī)便能重構(gòu)出樣品內(nèi)部清晰的三維結(jié)構(gòu)。這一原理徹底解決了普通寬場(chǎng)顯微鏡中圖像模糊、對(duì)比度低的問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)了真正的光學(xué)切片和高分辨率三維成像，為研究細(xì)胞器空間分布、材料內(nèi)部孔隙結(jié)構(gòu)等提供了不可替代的手段。
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CLSM的共聚焦光路設(shè)計(jì)使其在橫向（XY）和軸向（Z）分辨率上均優(yōu)于普通顯微鏡。理論上，其橫向分辨率可達(dá)約180納米，軸向分辨率可達(dá)約500納米（取決于物鏡和波長(zhǎng)）。更重要的是，其對(duì)比度得到極大提升。對(duì)于熒光樣品，能精確排除焦外熒光干擾，獲得信噪比極高的圖像；對(duì)于反射模式下的材料樣品，能清晰呈現(xiàn)表面起伏和微觀結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)。這使得CLSM能夠清晰分辨緊密相鄰的微小結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞骨架纖維、納米顆粒的聚集狀態(tài)等，這是普通顯微鏡無(wú)法實(shí)現(xiàn)的。
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