臨床醫(yī)生和科學家使用各種工具來研究罕見病。 收集患者的數(shù)據(jù)和標本對于了解 TM 和 NMO 至關(guān)重要,但為了了解疾病的基本生物學特性,科學家通常使用疾病的動物模型。 迄今為止,還沒有公認的特發(fā)性橫貫性脊髓炎 (TM) 或視神經(jīng)脊髓炎 (NMO) 動物模型。 然而,幾十年來,一直存在一種稱為實驗性自身免疫性腦脊髓炎 (EAE) 的多發(fā)性硬化癥實驗?zāi)P汀?該模型不完善,不能完全復(fù)制 MS,但可用于各種實驗。 在人類中,MS、TM 和 NMO 被認為是由意外針對大腦、視神經(jīng)或脊髓的免疫系統(tǒng)引起的。 在 EAE 中,小鼠的免疫系統(tǒng)準備好瞄準大腦、視神經(jīng)或脊髓。 在人類中,免疫系統(tǒng)的不同部分(例如 B 細胞和 T 細胞)在 MS、TM 和 NMO 的發(fā)病機制中起著關(guān)鍵但可變的作用。MOG是目前常用建立EAE模型的髓鞘抗原,多以誘發(fā)慢性EAE(Chronic EAE)模型。寧夏真實的eae模型造模方法
通過對EAE動物模型的深入研究,科學家們有望為多發(fā)性硬化癥(MS)患者帶來更加有效的療愈方法和更好的生活質(zhì)量。EAE動物模型作為模擬MS病理過程的重要工具,為科學家們提供了一個獨特的實驗平臺,使他們能夠更深入地了解MS的發(fā)病機制和療愈靶點。通過深入研究EAE動物模型的病理變化、免疫反應(yīng)以及神經(jīng)再生等方面,科學家們可以篩選出潛在的療愈藥物或方法,并評估其療效和安全性。這些研究成果有望為MS患者提供更加個性化和精細的療愈方案,幫助他們減輕癥狀、延緩病情進展,并提高他們的生活質(zhì)量。因此,對EAE動物模型的深入研究將為MS患者帶來希望,并為未來的醫(yī)學進步開辟新的道路。黑龍江比較好的eae模型是哪家只有EAE的NHP模型才可以對人源性抗體進行臨床前評估。
獲取實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型小鼠小膠質(zhì)細胞,并檢測其特性。方法取8周齡,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至發(fā)病高峰期(第15天)時以PBS灌注后取小鼠后腦和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通過100μm濾網(wǎng)濾過,而后采用Percoll密度梯度離心法分離獲取單個核細胞,進一步利用CD11b與CD45抗體染色,通過流式細胞儀分選CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)細胞,即分別得到相對活化和靜息的小膠質(zhì)細胞,***對流式分選獲取的小膠質(zhì)細胞行qPCR檢測。結(jié)果通過形態(tài)比較,獲得了高純度的小膠質(zhì)細胞。FIZZ-1基因行qPCR檢測,結(jié)果顯示在EAE急性期M2型小膠質(zhì)細胞明顯增多,符合文獻報道。結(jié)論該方法能從EAE小鼠體內(nèi)分離獲取高純度的小膠質(zhì)細胞,可用于相關(guān)目的基因后續(xù)檢測。
MOG,英文全名Myelinoligodendrocyteglycoprotein,中文名髓鞘少突膠質(zhì)細胞糖蛋白,髓鞘的一種微量成分,屬于免疫球蛋白超家族成員之一。t也是特定表達于***系統(tǒng)(CNS)的自身抗原,誘導多發(fā)性硬化癥的原發(fā)性脫鞘特征。MOG(35-55)是髓鞘少突膠質(zhì)細胞糖蛋白的免疫優(yōu)勢表位,能夠誘導強烈的T細胞和B細胞應(yīng)激反應(yīng),具高度致腦炎性,能夠誘導嚙齒類動物的實驗性白身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型。EAE是**普遍的MS動物模型,具有MS許多的臨床和病理生理學特征。單次注射MOG(35-55)能夠產(chǎn)生一種復(fù)發(fā)-緩解型神經(jīng)性疾病,表現(xiàn)出大量斑塊狀脫髓鞘病癥。1-甲基-4-苯基-1,.2,3,6-四氫吡啶(MPTP)誘導的多巴胺神經(jīng)元損傷模型,免疫接種MOG(35-55)能抑制該神經(jīng)元的白發(fā)再生功能。EAE模型是實驗動物通過神經(jīng)組織(其中的某些成分)或病毒誘導產(chǎn)生的。
EAE模型的發(fā)展與年齡密切相關(guān)。幼齡動物發(fā)病后癥狀很快達到高峰,隨后又迅速恢復(fù),和成年動物相比病程較短,其抗原注射部位及CNS內(nèi)的炎性細胞浸潤程度較輕,并且幼齡動物體重偏小,一般情況差,易出現(xiàn)麻醉意外而死亡。若動物體重(周齡)偏大,則發(fā)病延遲,且癥狀較重,所以選擇受試動物以青年期為佳。但若作為抗原提供者,其年齡可適當放寬,一般大于4周即可。MS多為青年女性,EAE的發(fā)生也存在性別差異。一般來講,雌性動物較雄性敏感,表現(xiàn)在雌性動物的發(fā)病率高,臨床癥狀相對嚴重,如Wistar大鼠及SJL/J小鼠,但也有的動物如Lewis大鼠,雄性較雌性敏感。另外實驗時間選擇在夏季比冬春季節(jié)誘導動物模型的敏感性更高。敏感性高的動物,有時癥狀較嚴重且死亡率高,應(yīng)引起注意。eae模型是實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型的縮寫。寧夏真實的eae模型造模方法
將抗原與佐劑的混合乳劑直接注射至動物體內(nèi),經(jīng)過一定時間的潛伏期,誘導EAE模型的產(chǎn)生。寧夏真實的eae模型造模方法
通常不同品種動物對同一抗原的敏感性不同、不同抗原的抗原性也不同,并且不同來源的同一抗原的活性也有明顯差異。一般情況下,抗原性強弱依次為豚鼠脊髓>大鼠脊髓>牛脊髓,脊髓組織>腦組織,豚鼠MBP>牛MBP。蛋白或多肽單體不但結(jié)構(gòu)明確,而且可以精確定量,因此利于進行EAE發(fā)病機制研究,但不易獲得。脊髓勻漿和腦組織勻漿兩種抗原均含有多種抗原表位,且易于獲得,適用于多種動物,但其成分復(fù)雜,不易精確定量,這給某些特殊研究造成不便。誘導鼠類產(chǎn)生EAE模型的異種抗原,以新鮮豚鼠脊髓制備的抗原佐劑乳化物為比較好。在一定范圍內(nèi)抗原的量和EAE的發(fā)病率及發(fā)病程度有相關(guān)性,注射抗原佐劑乳化物的劑量越大,EAE的發(fā)病率越高??乖膭┝靠梢騽游锏钠废?、抗原種類、免疫方法、研究目的等的不同而有很大變化。另外,抗原的物理狀態(tài)也很重要,高分散度的抗原易于被吞噬和遞呈,進而較高效率地***免疫系統(tǒng)。寧夏真實的eae模型造模方法